[发明专利]猪白细胞干扰素的制备方法

摘要

本发明公开了一种猪白细胞干扰素的制备方法，使用鸡新城疫病毒(NDV)作为诱生剂诱导健康猪白细胞，经培养、灭活病毒、除菌、分装和冻干等工艺，制成的猪白细胞干扰素冻干粉针剂，注入动物机体后，具有疗效好、安全可靠、无毒副作用和不污染环境等特点。可用于防治猪上呼吸道感染、流行性腹泻等病毒性疾病。也可供实验室研究使用。

主权项

1、猪白细胞干扰素的制备方法，包括以下步骤：(1)、以2000rpm离心装有猪的新鲜抗凝血瓶30min，收集灰黄层，得到富含白细胞的悬液，用已预温的培养液稀释成1×107白细胞/ml；(2)、在已稀释好的细胞悬液中加入少量粗纯猪白细胞干扰素，使其最终浓度为100单位/ml，置于37℃水浴摇床搅拌培养2小时；(3)、在启动后的猪白细胞悬液中加入鸡新城疫病毒NDV，使其最终浓度为100～150血凝单位/ml，并同时在白细胞悬液中加入原全血液1～1.5倍体积量的含10％猪血清或猪血浆的RPMI 1640营养液，加入终浓度为10μg/ml的卡那霉素，调悬液pH7.4，37℃摇床搅拌培养18～24小时；(4)、经2000rpm～3000rpm离心30min，取上清液，加入6N HCl调至pH2.0，4放置4～5天，灭活病毒，每日振摇2～3次；再用6N NaOH调至pH7.2，即得到猪白细胞干扰素粗制品。