[发明专利]一种可增强蛋白质凝胶电泳区带分辨率和信号强度的方法无效
| 申请号： | 200410066776.X | 申请日： | 2004-09-29 |
| 公开（公告）号： | CN1588032A | 公开（公告）日： | 2005-03-02 |
| 发明（设计）人： | 栾洁;周炳荣;戚中田 | 申请（专利权）人： | 中国人民解放军第二军医大学 |
| 主分类号： | G01N27/447 | 分类号： | G01N27/447;G01N27/26;G01N21/76;G01N33/561;G01N21/25 |
| 代理公司： | 上海新天专利代理有限公司 | 代理人： | 衷诚宣 |
| 地址： | 20043*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明涉及蛋白质检测技术领域，是一种可增强蛋白质凝胶电泳区带分辨率和信号强度的方法。本发明方法包括蛋白质样本制备、聚丙烯凝胶电泳的分离和蛋白质区带的显色，其特征在于对检测的蛋白质样本用丙酮处理后再行电泳分离，这样可明显增强蛋白质显色信号强度，有利于检测样本中低丰度蛋白质的被发现，这就为进一步分析判断提供了方便。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 增强 蛋白质 凝胶电泳 分辨率 信号 强度 方法 | ||
【主权项】：
1.一种可增强蛋白质凝胶电泳区带分辨率和信号强度的方法，包括待测蛋白质样本的制备、聚丙烯凝胶电泳的分离以及蛋白质区带的显色，其特征在于所说的待测蛋白质样本是指动物组织匀浆液或细胞培养液、细菌裂解液、动物体液(血浆、血清)经丙酮处理过的蛋白质样本，处理条件为：将匀浆液或体液或培养液或裂解液离心取上清，将上清与丙酮以1∶5(v/v)混匀，置-20℃2小时以上或过夜，离心取沉淀，将沉淀溶解于样本缓冲液[60mMTris.Cl pH6.8，25％甘油，2％十二烷基磺酸钠(SDS)，14.4mM 2-巯基乙醇，0.1％溴酚蓝]，煮沸5分钟，离心取上清即为蛋白质样本液；所说的聚丙烯凝胶电泳所用的是SDS-PAGE凝胶分离系统，每孔点样量约80μg蛋白质；所说的蛋白质区带显色是指考马斯亮蓝染色或转移的蛋白质区带免疫印迹和化学发光显色。
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