[发明专利]一种分子克隆快速鉴定方法无效
| 申请号： | 200410067739.0 | 申请日： | 2004-10-28 |
| 公开（公告）号： | CN1635151A | 公开（公告）日： | 2005-07-06 |
| 发明（设计）人： | 郑树;陈功星;张佳炜 | 申请（专利权）人： | 浙江大学医学院附属第二医院 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 杭州求是专利事务所有限公司 | 代理人： | 赵杭丽;张法高 |
| 地址： | 310009浙*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本发明提供一种分子克隆快速鉴定方法，包括：一快速提取质粒，二单酶多切和RNA消化。快速提取质粒能够在一毫升左右的菌液中，约半个小时内得到满足克隆鉴定的质粒量。单酶多切和RNA消化是对前面提取的质粒，经单一的限制性内切酶把目的碱基序列片段，或者部分碱基序列片段切割下来，组成多个限制性内切酶位点，同时用RNA酶消化RNA，经电泳，完成阳性克隆的鉴定。本发明方法仅需半天时间就可完成阳性克隆质粒鉴定，表现出了高效率的特点，是一种操作更简单、方便，效率更高，试剂等耗费很少的完善分子克隆技术的快速鉴定方法。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 分子 克隆 快速 鉴定 方法 | ||
【主权项】：
1.一种分子克隆快速鉴定方法，包括快速提取质粒，其特征是：还包括单酶多切和RNA消化，具体通过以下步骤实现：(1)快速提取质粒①离心收集培养过的质粒转化细菌液体，②低渗液体悬浮细菌，③核酸提取液抽提质粒，④洗涤质粒，(2)单酶多切和RNA消化①根据重组质粒选用多切位点单一限制性内切酶，②质粒溶解及酶处理，③电泳，④鉴定。
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