[发明专利]CHO细胞生产的人源抗甲肝病毒基因工程抗体

摘要

CHO细胞生产的人源抗甲肝病毒基因工程抗体包括两株人源抗甲肝病毒中和性基因工程抗体CHO(中国倉鼠卵巢细胞)生产细胞系极其生产的预防和治疗用人源抗甲肝病毒中和性基因工程抗体制剂。其产品特征为来源于噬菌体人源抗体库筛选的与人源IgGFc基因重组后在中国倉鼠卵巢(CHO)细胞稳定表达细胞的全人源抗体IgG1λ和IgG1κ，分别命名ChHAIgG16和ChHAIgG78。分子量为150kd左右。由ChHAIgG16和ChHAIgG78以3∶1混合的鸡尾酒式抗体制剂，命名HAMax^TMM。利用其高度中和甲肝病毒感染的功能特性和与天然抗体分子类似的全抗体分子结构特征，可望在临床上替代血制品丙种球蛋白而用于预防和治疗由甲肝病毒感染引起的甲型肝炎。

主权项

1.人源抗甲肝病毒基因工程抗体，其特征在于：1)为来源于噬菌体人源抗体库筛选的与人源IgGFc基因重组后在CHO稳定表达细胞的全人源IgG1λ全抗体，它由两条重链和两条λ-κ嵌合轻链组成，分子量为150kD左右，命名ChHAIgG16；2)为来源于噬菌体人源抗体库筛选的与人源IgGFc基因重组后在CHO稳定表达细胞的全人源IgG1κ全抗体，它由两条重链和两条κ轻链组成，分子量为150kD左右，命名ChHAIgG78；3)人源抗甲肝病毒基因工程抗体ChHAIgG16或ChHAIgG78，其可变区基因组成特征为特异性的轻链和重链基因，来源于对人源抗甲肝病毒抗体基因库的特异性富积筛选表达，其相应的三个CDR区序列为本抗体特有的全新序列，其中ChHAIgG16轻链和重链可变区基因序列已在专利公开号为CN1316437A专利申请中陈述；ChHAIgG78轻链可变区CDR1，CDR2和CDR3序列为分别“RASQSVSSSYLA”，“GASSRAT”和“QQYGSSPLT”；HAV78IgG重链可变区CDR1，CDR2和CDR3序列为分别“SHEMN”，“YIGSRGSDTSYADSVKGR”和“ERYRYFEDYYHGLDV”；其基因特征决定了其对甲肝病毒的亲和力和中和保护功能；4)人源抗甲肝病毒基因工程抗体ChUAIgG16或ChHAIgG78，其轻重链先导序列和恒定区基因来源于哺乳类细胞人源抗体高效表达载体VH-dhfr1和VK-dhfr1，该载体已在专利公开号为CN1363682专利申请中陈述；5)是通过哺乳类细胞表达载体系统，在CHO工程细胞系中生产的特异性结合和识别甲肝病毒外壳蛋白的高亲和力中和性人源完全抗体，具有与天然抗体分子类似的全抗体分子结构特征；其结合甲肝病毒外壳蛋白和中和病毒感染的功能由存在于抗体基因轻链和重链可变区的决定族互补区域CDR1、CDR2和CDR3中特异性核苷酸序列决定，其相应的氨基酸序列构成了抗体的特异性抗原结合区域。