[发明专利]天然1，3，7，9－四甲基尿酸的生产工艺

摘要

本发明涉及一种天然1，3，7，9－四甲基尿酸的生产工艺。本发明采用野生或栽培变种苦茶Camellia assamicavar.kucha为原料，经过杀青、烘干、粉碎、溶剂提取、氯仿萃取或聚酰胺柱层析、反相色谱分离步骤富集获得1，3，7，9－四甲基尿酸。较以往1，3，7，9－四甲基尿酸制备方法比，本发明所述的生产工艺具有以天然植物为来源，成本低廉，原料中1，3，7，9－四甲基尿酸含量较高，工艺流程简单，产品得率高等特点。

主权项

1、天然1，3，7，9-四甲基尿酸的生产工艺，其特征在于：采用野生或栽培变种苦茶Camellia assamica var.kucha为原料，经过杀青、烘干、粉碎、溶剂提取、氯仿萃取或聚酰胺柱层析、反相色谱分离步骤富集获得1，3，7，9-四甲基尿酸，具体步骤如下：A)苦茶提取液的制备将新鲜采摘的苦茶于笼屉上水蒸气加热迅速杀灭酶活性2.5分钟；取出晾干，于60℃烘箱中过夜烘干，干燥后粉碎成苦茶粉末；将苦茶粉末称重，以10～50倍量的水、乙醇或者含水乙醇于80～90℃浸提30～60分钟，过滤，将滤渣再以10～50倍量的水、乙醇或者含水乙醇于80～90℃浸提30～60分钟，过滤，合并两次滤液，减压浓缩成小体积，得苦茶提取液；B)苦茶总嘌呤生物碱的制备将苦茶提取液以等体积氯仿萃取三次，合并氯仿萃取液，减压回收氯仿，得苦茶总嘌呤生物碱部分；或者以聚酰胺填料装填开放玻璃柱管，苦茶提取液直接上样，水洗20个柱体积，减压蒸干水洗部分，得苦茶总嘌呤生物碱；C)1，3，7，9-四甲基尿酸的制备将苦茶总嘌呤生物碱部分溶解于10％甲醇-水溶液，ODS(反相C-18)填料以甲醇溶涨后装填开放玻璃柱，将ODS开放柱中的甲醇替换成10％甲醇-水后，将苦茶总嘌呤生物碱溶液上样，以10％甲醇-水衡比例洗脱。洗脱液以三分之一或二分之一保留体积收集为一个流分，以硅胶薄层层析检查，Rf值：可可碱＞1，3，7，9-四甲基尿酸＞咖啡碱，合并相同流分，减压蒸干得四甲基尿酸纯品；D)结构鉴定和含量测定制得的1，3，7，9-四甲基尿酸经熔点、红外光谱或质谱的简单测定与标准品或者文献数据对照即可确证其化学结构，经RP-HPLC鉴定其纯度大于99％。