[发明专利]中国桔梗重瓣新品种快速育成的方法

摘要

本发明涉及一种中国桔梗重瓣新品种快速育成的方法，经过芽变新品种的选育，外植体的选择、灭菌，诱导培养，增殖培养，继代培养，生根培养后移栽成活。本发明解决了现有技术难于将中国桔梗重瓣品种的优良种性快速地固定并保持下来的难题，有效缩短了育种周期，减少了不定芽发生变异的机率，使优良种性得以保持，生产的增殖苗和生根苗，苗相健壮、节间短而粗壮、叶色浓绿，质量优，移栽成活率高。另外能使种苗来源单一，易控制，繁殖速度快，且在培养室内即可实现周年生产，既节约了土地资源，同时又易于标准化、工厂化操作，有效地提高了种苗质量。

主权项

1、一种中国桔梗重瓣新品种快速育成的方法，其特征在于经过下列步骤：1)、芽变新品种的选育：在植株的盛花期，选择生长健壮、无病虫害、不畸形、花型与株型优美的芽变枝条；2)、外植体的选择：在发生芽变的开花枝条上，选取已开花的花朵基部上着生的幼嫩花蕾作为外植体，并控制在突变枝条上；3)、外植体灭菌：选取的幼嫩花蕾在浓度为0.1％的洗衣粉水中浸泡2～5分钟后，用自来水冲洗干净，放入超净工作台内，在0.1～0.2％的Hgcl2溶液中灭菌15min～25min，再转至1～2％的次氯酸钠溶液中消毒15min～20min，最后取出在无菌水中漂洗3～5次；4)、诱导培养：将经过上述消毒灭菌后的幼嫩花蕾在无菌条件下接种于下列诱导培养基中：MS基本培养液6-苄基氨基嘌呤(6-BA) 0.1～0.4mg/L萘乙酸(NAA) 0.02～0.2mg/L蔗糖 25000～35000mg/L琼脂 4500～6000mg/LpH 5.5～6.0在培养温度为22±2℃，光照时间10～12h/d，光照强度2000～3000Lx的环境条件下，培养20～25d后，在幼嫩花蕾的基部形成不定芽；5)、增殖培养：在无菌条件下，将上述诱导出的不定芽分切后转入下列增殖培养基中：MS基本培养液6-苄基氨基嘌呤(6-BA) 0.05～0.20mg/L糠基腺嘌呤(KT) 0.02～0.1mg/L萘乙酸(NAA) 0.05～0.15mg/L蔗糖 25000～35000mg/L琼脂 4500～6000mg/LpH 5.5～6.0在培养温度为20±2℃，光照时间12～14h/d，光照强度2000～3000Lx的环境条件下，培养15～20d，每个不定芽可增殖成1～2个芽，芽体高度为2cm～3cm：6)、继代培养：将上步所增殖的不定芽在无菌条件下按节切成茎节与茎尖，接入同样的增殖培养基中，在相同的培养环境下进行培养，得到大量的无根不定芽，继代周期为15～20d，繁殖倍数2～3；7)、生根培养：增殖基数达到繁殖基数时，将增殖苗上部约1cm长的茎尖切下，插入到下列的生根培养基中：1/2 MS基本培养液(大量元素减半)萘乙酸(NAA) 0.1～1.0mg/L蔗糖 25000～35000mg/L琼脂 4500～6000mg/LpH 5.5～6.0放入与步骤6)相同(继代培养)的环境条件下培养，15d生根率达80％以上，根数达5～8，色白，愈伤组织少；8)、移栽：自瓶内取出高约1.5cm的健壮、苗色浓绿的有根小苗，洗去附着于根上的培养基，移栽至珍珠岩∶腐质土＝1∶1的基质内，栽后浇足水，前期保持85％的相对湿度，以后逐渐降低湿度和增加光照，常规病虫害防治，成活率可达80％以上，当过渡苗长至3cm～5cm高，根系生出大量须根时，定植于田间栽培。