[发明专利]一种以节杆菌AS－2菌株制备的生物制剂及其应用

摘要

本发明涉及一种以节杆菌AS－2菌株制备的生物制剂及其应用，属微生物技术领域。本生物制剂的生产菌株为节杆菌(Arthrobacter sp.)AS－2菌株，该菌株已保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCCNO.1282；该生物制剂由试管种培养、菌种摇床扩大培养、种子罐、发酵罐液体发酵工序制备。菌种接种量为0.5－2％，采用的培养基配方为(W/V)：牛肉膏0.3％，酵母浸膏0.1％，蛋白胨0.5％，葡萄糖1.0％，pH6.8－7.2。控制发酵温度在28－30℃，pH7.0－7.2，种子罐发酵为16－20小时，发酵罐发酵时间为24－48小时，当发酵液中细菌数量达到7.0×10⁸个/ml时，得到生物制剂。本发明具有发酵周期短，节约能源、成本低，无毒、无污染；利于加工成各种剂型，便于贮存和运输；能降碱增香，提高烟草的品质等优点。

主权项

1.一种以节杆菌AS-2菌株制备的生物制剂，由生产菌株按液体发酵生产方法制备，其特征在于该生物制剂的生产菌株为节杆菌(Arthrobacter sp.)AS-2菌株，该菌株已保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCC NO.1282；液体发酵生产制备生物制剂的过程为：(1).液体发酵生产过程包括试管种培养、菌种摇床扩大培养、种子罐发酵、发酵罐液体发酵制备生物制剂；其中：a.试管种培养为：将Arthrobacter sp.AS-2的菌体接种到试管固体培养基斜面上，培养基配方为1000毫升蒸馏水中添加牛肉膏3g，酵母浸膏1g，蛋白胨5g，葡萄糖10g，控制pH6.8-7.2，在28-30℃下培养1-2天，获得试管种；b.菌种摇床扩大培养为：将斜面菌种接种到三角瓶液体培养基中，培养基配方为1000毫升蒸馏水中添加牛肉膏3g，酵母浸膏1g，蛋白胨5g，葡萄糖10g，控制pH6.8-7.2，在28-30℃、转速200-300rpm的摇床培养16-20小时；c.液体种子罐发酵为：将摇床扩大的菌种按0.5-2％的比例接种于不同容量的发酵罐中，培养基配方为摇床扩大培养的培养基配方，培养温度为28-30℃，培养时间为16-20小时；d.液体发酵罐制备生物制剂为：将经种子罐发酵逐级扩大的菌种按1-3％的比例接种于不同容量的发酵罐中，培养基配方为菌种摇床扩大培养的培养基配方，培养温度为28-30℃，pH7.0-7.2，培养时间为24-48小时，当发酵液中细菌数量达到7.0×108个/ml时，得到生物制剂。