[发明专利]能催化吲哚生成靛蓝的 P450BM－3变体基因及其用途无效
| 申请号： | 200410089174.6 | 申请日： | 2004-11-29 |
| 公开（公告）号： | CN1644695A | 公开（公告）日： | 2005-07-27 |
| 发明（设计）人： | 梅乐和;李红梅;姚善泾 | 申请（专利权）人： | 浙江大学 |
| 主分类号： | C12N15/52 | 分类号： | C12N15/52;C12N15/53;C12N9/02;C12P17/10 |
| 代理公司： | 杭州求是专利事务所有限公司 | 代理人： | 张法高 |
| 地址： | 310027浙*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种能催化吲哚生成靛蓝的P450BM－3变体基因及其用途。它通过易错PCR技术介导的随机突变，筛选获得的P450BM－3变体基因，该P450BM－3变体基因中的第39位的异亮氨酸(Ile)的密码子ATC突变为缬氨酸(Val)的密码子GTC，所得到的P450BM－3变体基因(Ile39→Val)P450BM－3，该变体基因序列为SEQ ID No.1核苷酸序列，并且编码细胞色素P450BM－3的单加氧酶。P450BM－3变体基因表达得到的P450BM－3变体蛋白酶能催化吲哚生成染料靛蓝。本发明创造了一种对吲哚具有更高催化活力的P450BM－3变体基因，其突变位点为Ile39→Val，该变体基因表达的突变酶能构催化吲哚生成染料靛蓝，与R.D.Schmid领导的科研小组获得的具有三个突变位点P450BM－3(Phe87Val，Leu188Gln，Ala74Gly)变体酶相比较，在测定的一例中活性提高了1.2－1.4倍，为生物转化生产染料靛蓝提供了广阔的应用前景。 | ||
| 搜索关键词： | 催化 吲哚 生成 靛蓝 p450bm 变体 基因 及其 用途 | ||
【主权项】：
1.一种能催化吲哚生成靛蓝的P450BM-3变体基因，其特征在于：通过易错PCR技术介导的随机突变，筛选获得的P450BM-3变体基因，该P450BM-3变体基因中的第39位的异亮氨酸(Ile)的密码子ATC突变为缬氨酸(Val)的密码子GTC，所得到的P450BM-3变体基因(Ile39→Val)P450BM-3，该变体基因序列为SEQ ID No.1核苷酸序列，并且编码细胞色素P450BM-3的单加氧酶。
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