[发明专利]一种转印蛋白质的狭缝电转印技术有效
申请号: | 200410089432.0 | 申请日: | 2004-12-08 |
公开(公告)号: | CN1645140A | 公开(公告)日: | 2005-07-27 |
发明(设计)人: | 黄云坚;袁国亮;项春梅;王贻杰;吕小玉;张梦华;朱旭辉;邹龙盛;金妙坚 | 申请(专利权)人: | 浙江澳亚生物工程研究院有限公司 |
主分类号: | G01N33/48 | 分类号: | G01N33/48;G01N33/00;C12Q1/68 |
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摘要: | 本发明公开了一种转印蛋白质的狭缝电转印技术。本发明的技术方案是:首先制备狭缝滤膜;在1×电转缓冲液中浸泡海绵垫、滤纸和电转印用膜到充分湿润;制备凝胶条,并在1×电转缓冲液中漂洗;将海绵垫、滤纸、凝胶条、狭缝滤膜、电转印用膜、滤纸、海绵垫依次平放于电转印装置夹板上,凝胶条在阴极端,电转印用膜在阳极端,组成夹层组合;将电转印夹层组合放入转印槽中,电转印用膜端紧靠正极;然后于1V/cm转印60-70分钟左右;转印结束后立即断开电源,小心拆开装置,在膜上做好所需的标记。这样蛋白质定向定位得比较好,并提高了蛋白质吸附量,提高了免疫印迹检测的灵敏度与特异性,更易判读检测结果,还避免检测结果的错判。 | ||
搜索关键词: | 一种 蛋白质 狭缝 电转印 技术 | ||
【主权项】:
1.一种转印蛋白质的狭缝电转印技术,其特征在于:a.狭缝滤膜的制备:用75%的酒精将狭缝模板擦洗干净,自然干燥后,将0.45μm厚度的滤膜衬于模板下面,用刀在狭缝模板的狭缝中切割滤膜(4),在滤膜上切割出狭缝(6),该狭缝的长度小于电转印用膜的宽度;b.操作方法:将海绵垫(1)、滤纸(2)和电转印用膜(3)分别浸泡在1×电转缓冲液(40-50ml)中30-60分钟,保证海绵垫、滤纸和电转印用膜充分的湿润;制备凝胶条,放入1×电转缓冲液中漂洗1-2分钟;准备电转装置:将电转印用膜(3)、狭缝滤膜(4)和凝胶条(5)紧紧贴牢,并在电转印用膜(3)的外侧和凝胶条(5)的外侧分别置放两层滤纸(2)和一层海绵垫(1),然后一起平放于电转印装置夹板上,凝胶条(5)在阴极端,电转印用膜(3)在阳极端,构成电转印夹层组合;将电转印夹层组合放入转印槽中,电转印用膜端紧靠正极;然后于1V/cm转印60-70分钟左右;转印结束后立即断开电源,小心拆开装置,在膜上做好所需的标记。
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