[发明专利]一种定量丹参组份差异的高速逆流指纹谱的方法

摘要

本发明涉及一种定量丹参组份差异的高速逆流指纹谱的方法。它包括采用高速逆流(HSCCC)分离纯化，建立HSCCC指纹谱的方法误差，确定HSCCC指纹谱的方法，以相对保留时间和相对峰面积为主要参数，以相对偏差、相对标准偏差和差异率，直观量化不同丹参样品中各对应组分的的差异程度。可提高对丹参药材真伪优劣鉴别的标准，适用于高粘度及易造成固定相吸附的样品的分析。

主权项

1、一种定量丹参组份差异的高速逆流指纹谱的方法，其特征在于包括下列步骤：(1)，供试品的制备：常规制备3个批次的丹参粗提物，确定是丹参蒽醌类化合物；(2)，用高速逆流色谱分离纯化相提物，HSCCC的溶剂体系由三个组分构成，A组分可选自正庚烷、正己烷、正戊烷等正构烷烃，B组分可选自甲醇、乙醇、正丁醇、丙酮脂肪醇及脂肪酮，C组分为水；(3)紫外检测器检测洗脱液，绘制各组份的紫外吸收与洗脱时间的关系图；得到各批次药材的色谱图，选取共有指纹峰；计算高速逆流色谱指纹谱的方法误差(表3)；制定3批药材的指纹谱(表4)，以标准药材为准，计算差异率。 表3丹参饮片的HSCCC数字化指纹谱的方法误差 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12相对 tR实验1 0.30 0.34 0.39 0.49 0.64 0.79 1 1.55 2.02 2.62 3.53 4.14实验2 0.29 0.33 0.40 0.49 0.64 0.78 1 1.52 1.97 2.57 3.43 4.02实验3 0.29 0.34 0.39 0.49 0.63 0.77 1 1.57 2.07 2.64 3.63 4.24平均 0.293 0.337 0.393 0.490 0.637 0.780 1 1.547 2.020 2.610 3.530 4.133相对 tR 相对偏差实验1 0.02 0.01 -0.01 0 0.01 0.01 0 0.01 0 0.01 0 0.01实验2 -0.01 -0.02 0.02 0 0.01 0 0 -0.02 -0.02 -0 02 -0.03 -0.03实验3 -0.01 0.01 -0.01 0 -0.01 -0.01 0 0.01 0.02 0.01 0.03 0.03相对tR RSD(％) 0.02 0.02 0.02 0 0.01 0.01 0 0.02 2.47 1.38 2.83 2.16相对 A实验1 0.17 0.10 0.16 0.33 0.29 0.31 1 1.50 0.76 1.04 4.56 0.37实验2 0.17 0.10 0.16 0.32 0.30 0.31 1 1.51 0.71 1.01 4.25 0.35实验3 0.15 0.10 0.16 0.29 0.29 0.29 1 1.45 0.73 0.95 4.33 0.33平均 0.163 0.100 0.160 0.313 0.293 0.303 1 1.487 0.733 1.000 4.380 0.35相对 A相对偏差实验1 0.04 0 0 0.05 -0.01 0.02 0 -0.01 0.04 0.04 0.04 0.06实验2 0.04 0 0 0.02 0.02 0.02 0 0.02 -0.03 0.01 -0.03 0实验3 -0.92 0 0 -0.07 -0.01 -0.04 0 -0.02 -0.01 -0.05 -0.01 -0.06相对A RSD(％) 7.09 0 0 6.65 1.69 1.63 0 2.16 3.43 4.58 3.67 5.71 表4丹参饮片的HSCCC数字化指纹谱 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12相对 tR河北产0.41 0.47 0.54 0.61 0.72 0.84 1.00 1.38 1.64 2.11 3.04 3.62山东产0.40 0.47 0.53 0.61 0.73 0.84 1.00 1.37 1.64 2.10 3.07 3.63江苏产0.40 0.49 0.56 0.63 0.73 0.86 1.00 1.35 1.64 2.07 3.10 3.65平均0.403 0.477 0.543 0.613 0.727 0.847 1.000 1.367 1.64 2.093 3.070 3.633相对 tR 相对偏差河北产1.7 -1.5 -0.6 -0.5 -1.0 -0.8 0 1.0 0 0.8 -1.0 -0.4山东产-0.7 -1.5 -2.4 -0.5 0.4 -0.8 0 0.2 0 0.3 0 -0.08江苏产-0.7 2.7 3.1 2.8 0.4 1.5 0 -1.2 0 -1.1 1.0 0.5相对tR RSD(％)1.44 2.42 2.81 1.87 0.8 1.36 0 1.11 0 1 1 0.42相对峰面积河北产0.10 0.01 0.02 0.10 0.12 0.03 1.00 0.27 0.46 0.54 2.05 0.42山东产0.22 0.01 0.01 0.19 0.08 0.07 1.00 1.56 0.13 0.62 3.77 0.10江苏产0.09 0.01 0.01 0.15 0.13 0.02 1.00 0.59 0.28 0.89 3.17 0.21相对A RSD(％)52.81 0 44.52 30.68 24.05 24.05 0 83.24 56.97 53.83 29.31 66.91差异率山东产0.40 0.67 0.8 0.25 0.58 0.8 0.34 2.82 0.82 0.25 0.22 0.84江苏产0.30 0.67 0.80 0.15 0.21 0.40 0.22 0.72 0.53 0.28 0.21 0.60