[发明专利]一种定量检测动物细胞凋亡和坏死的方法及其应用无效
申请号: | 200410091773.1 | 申请日: | 2004-11-26 |
公开(公告)号: | CN1779440A | 公开(公告)日: | 2006-05-31 |
发明(设计)人: | 陈昭烈;叶玲玲;刘红;吴本传;刘兴茂;熊福银;黄培堂;李世崇 | 申请(专利权)人: | 中国人民解放军军事医学科学院生物工程研究所 |
主分类号: | G01N21/64 | 分类号: | G01N21/64;C12Q1/06 |
代理公司: | 北京北新智诚知识产权代理有限公司 | 代理人: | 张爱群 |
地址: | 100071*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | 本发明涉及一种定量检测动物细胞凋亡和坏死的方法及其应用,属于细胞工程技术领域。以YP和PI为检测用荧光染料,测量不同稀释度的细胞样品的YP和PI荧光强度及各细胞样品的凋亡细胞数和坏死细胞数;对YP荧光强度值与凋亡细胞数、PI荧光强度值与坏死细胞数作直线回归分析得到直线相关方程;测量待测样品的YP和PI值,代入直线相关方程,得到待测样品的凋亡细胞数和坏死细胞数。本发明可用于动物细胞培养中细胞凋亡诱因的筛查和抗凋亡化合物的筛选。优点为:①同时定量检测细胞凋亡和坏死,②能检测出样品中少至100个的凋亡细胞,灵敏度高、特异性强,③仪器和试剂价格相对便宜、检测成本低,④操作简便、快捷,可在短时间内完成对大批量细胞样品的凋亡检测。 | ||
搜索关键词: | 一种 定量 检测 动物 细胞 坏死 方法 及其 应用 | ||
【主权项】:
1.一种定量检测动物细胞凋亡和坏死的方法,其特征在于以YO-PRO-1(YP)和碘化丙啶(PI)为细胞凋亡检测的荧光染料,用荧光分光光度计分别测量具有不同稀释度的细胞样品的YP和PI荧光强度,用荧光显微镜判定各具有不同稀释度的细胞样品中的凋亡细胞数和坏死细胞数;对YP荧光强度值与凋亡细胞数、PI荧光强度值与坏死细胞数作直线回归分析,分别得到依据YP荧光强度值和PI荧光强度值求得凋亡细胞数和坏死细胞数的直线相关方程;用荧光分光光度计测量待测样品的YP和PI值,分别代入上述直线相关方程,得到待测样品中的凋亡细胞数和坏死细胞数。
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