[发明专利]一种苦荞麦过敏性贮藏蛋白基因的克隆及其应用

摘要

本发明通过RT－PCR和RACE技术克隆和序列测定获得苦荞麦过敏性贮藏蛋白基因(TBc)，该基因全长1548核苷酸，开放阅读框可编码一个515个氨基酸组成的蛋白质，其中包含22个氨基酸的信号肽序列和493个氨基酸的成熟肽序列，分子量约58kDa。将该基因3′端的部分结构基因(TBa)构建表达载体，通过原核表达后，可获得一个分子量约22kDa的功能蛋白，该功能蛋白包含195个氨基酸。由苦荞麦过敏性贮藏蛋白基因编码的完整蛋白质和功能蛋白均是苦荞中的主要过敏源，可促发由IgE介导的I型过敏反应。本发明可用于制备诊断和治疗特异性过敏症药物。

主权项

1.一种苦荞麦过敏性贮藏蛋白基因，其特征在于具有如下cDNA全长核苷酸序列： 1 ATGTCAACTA AACTCATCCT CTCCTTCTCC CTGTGCCTTA TGGTACTAAG 51 CTGCTCTGCG CAGGCAGCGC AGCTATGGCC ATGGCGGAAG GGACAAGACA 101 GCCGCCCCCA CCACGGCCAC CAGCAATTCC AGCAGCAATG TGATATCCAG 151 AGGCTCACCG CCTCTGAGCC CTCTCGTAGA GTCCGTTCTG AGGCCGGAGT 201 TACCGAGATT TGGGACTACA ACACCCCTGA GTTCCGATGC ACCGGATTTG 251 TCGCCGTCCG TTACGTAATT CAGCCAGGAG GCCTCTTGCT TCCTTCCTAC 301 TCCAACGCCC CTTACATCAC CTTTGTCGAG CAAGGGGAGG GAGTGCAGGG 351 AGTGGTCATC CCAGGATGTC CCGAGACCTT CCAGTCGGAC TCCGAGTACC 401 CTCAGTCTCA GAGAGGCCAA CGCTCCAGGC AGAGTGAGAG CGAAGAATCC 451 AGCCGCGGGG ACCAGCACCA GAAGATTTTC AGAGTCAGAG AAGGTGACGT 501 CATCCCATCT CCCGCCGGTG TCGTGCAGTG GACTCACAAC GACGGTGACC 551 AAGATCTCAT CAGTGTCACT CTTCTCGATG CCAACAGCTT CCACAACCAG 601 CTCGATGAGA ACGTTAGGAG CTTCTTCCTA GCTGGTCAGA GCCAGCAAGG 651 CAGGGAGGAA CGCCGCAGCC AGCAACAGAC GAGGGAGGAA GGCGGTGACC 701 GCCAATCCCG TGAGAGCGAT GACGTCGAAG CACTTATCGG CGCAAACATC 751 TTGAGTGGAT TCCAGGACGA GATCCTCCAC GAACTCTTCC GAGATGTTGA 801 CCGGGAGACC ATCAGCAAGC TCAGAGGCGA GAACGACCAG AGAGGATTCA 851 TCGTCCAGGC TCAGGACCTC AAACTCCGGG TCCCAGAGGA TTCTGAAGAA 901 GGATATGAGA GGCAAAGAGG TGACAGGAAA AGAGACGAAA GAGGAAGCGG 951 AAGGAGCAAT GGATTGGAGC AAGCGTTCTG TAACCTAAAA TTCAGGCAAA1001 ATGTTAACAG GCCTTCTCAC GCCGACGTCT TCAACCCACG CGCCGGACGT1051 ATCAACACCG TCAACAGTAA CAATCTCCCA ATCCTCGAAT TCCTCCAACT1101 TAGCGCCCAA CACGTCGTCC TCTACAAGAA TGCGATCATC GGACCGAGAT1151 GGAACTTGAA CGCACACAGC GCACTGTACG TGACAAGAGG AGAAGGAAGA1201 GTCCAGGTTG TTGGAGACGA AGGAAAGAGT GTATTCGACG ACAACGTGCA1251 GCGAGGACAG ATCCTTGTGG TGCCACAGGG ATTCGCAGTG GTGGTGAAGG1301 CAGGAAGACA AGGATTGGAG TGGGTGGAGT TGAAGAACAA CGATAACGCC1351 ATAACCAGTC CGATTGCCGG TAGGACTTCG GTGTTGAGGG CGATCCCTGT1401 GGAGGTACTG GCCAACTCGT ATGATATCTC GACGGAGGAA GCATACAAAT1451 TGAAGAATGG GAGGCAGGAG GTTGAGGTCT TCCGACCATT CCAGTCCCGA1501 TATGAGAAGG AGGAGGAGAA GGAGAGGGAA CGTTTCTCCA TAGTTTAA