[发明专利]一种以HIF为靶点的抗肿瘤药物筛选的方法及其应用无效

专利信息
申请号: 200410099288.9 申请日: 2004-12-29
公开(公告)号: CN1661042A 公开(公告)日: 2005-08-31
发明(设计)人: 周捷;陈菲;王弢 申请(专利权)人: 华东师范大学
主分类号: C12Q1/25 分类号: C12Q1/25;C12Q1/04;C12N15/09;G01N33/68;G01N21/64
代理公司: 上海德昭专利事务所 代理人: 程宗德;石昭
地址: 200062*** 国省代码: 上海;31
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摘要: 一种以HIF为靶点的抗肿瘤药物筛选方法及应用,属抗肿瘤药物筛选的技术领域。本发明的技术方案是构建稳定表达HRE和Luc的转染细胞株,通过检测Luc的活性,确定待筛选化合物对HIF的作用,实现对抗肿瘤药物的筛选。用上述方法的工作原理,可制成快速筛选以HIF为靶点的抗肿瘤药物的试剂盒。本发明具有自动化程度高、快速、高效、简便、直观且省药品等优点,适合应用于高通量快速筛选以HIF为靶点的抗肿瘤药物,特别适用于可供筛选的物质种类多,但含量少时的情况。
搜索关键词: 一种 hif 肿瘤 药物 筛选 方法 及其 应用
【主权项】:
1.一种以HIF为靶点的抗肿瘤药物筛选方法,其特征在于,包括以下步骤:第一步构建稳定表达HRE和Luc的转染细胞株①构建含人HRE和Luc基因的重组质粒;②转染人实体瘤或血癌细胞,获得稳定表达HRE和Luc的转染细胞株;第二步建立合适的磷光检测系统;第三步建立合适的低氧条件,在该条件时,转染细胞株的Luc活性增强;第四步进行以HIF为靶点的抗肿瘤药物筛选用待筛选化合物作用于转染细胞,在合适的低氧条件下孵育一定时间,检测Luc活性,如果待筛选化合物使细胞内的Luc活性减弱,说明该化合物可能是一种HIF的抑制剂,具有抗肿瘤血管生成的作用,因此是一种抗肿瘤药物。
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