[发明专利]一种抗转运蛋白类介导的肿瘤多药耐药逆转剂的筛选方法及应用无效
| 申请号： | 200410099290.6 | 申请日： | 2004-12-29 |
| 公开（公告）号： | CN1661040A | 公开（公告）日： | 2005-08-31 |
| 发明（设计）人： | 陈菲;王弢;周捷 | 申请（专利权）人： | 华东师范大学 |
| 主分类号： | C12Q1/00 | 分类号： | C12Q1/00;C12N15/79;C12N5/10;G01N21/64 |
| 代理公司： | 上海德昭专利事务所 | 代理人： | 程宗德;石昭 |
| 地址： | 200062*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 一种抗转运蛋白类介导的肿瘤多药耐药逆转剂的筛选方法及应用，属肿瘤多药耐药逆转剂筛选的技术领域。本发明的技术方案是构建转运蛋白高表达为特征的耐药细胞株，通过检测转运蛋白类底物荧光强度及其变化，确定待筛选的MDR逆转剂对MDR的逆转作用，实现对MDR逆转剂的筛选。用上述方法工作的原理，可制成快速筛选MDR逆转剂的试剂盒。本发明具有直观、快速、准确、高效、经济的优点。适合应用于高通量快速筛选MDR逆转剂。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 转运 蛋白 类介导 肿瘤 耐药 逆转 筛选 方法 应用 | ||
【主权项】：
1.一种抗转运蛋白类介导的肿瘤多药耐药逆转剂的筛选方法，其特征在于，转运蛋白指P-gp、MRP、BCRP和LRP，包括以下步骤：第一步构建转运蛋白高表达的耐药细胞株①构建含人肿瘤耐药相关的转运蛋白基因的真核表达质粒；②转染人肿瘤细胞，如实体瘤或血癌，获得稳定高表达该转运蛋白的细胞株；③确定获得的转染细胞株具有高表达该转运蛋白，并具有相应的MDR特性；第二步选择合适的荧光化合物作为转运蛋白的荧光底物第三步进行MDR逆转剂的筛选用待筛选化合物及荧光底物作用转染的耐药细胞，用荧光显微镜自带荧光度检测软件分析或荧光Elisa读值，如果待筛选化合物使细胞内的荧光增强说明该化合物具有逆转MDR作用。
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