[发明专利]DNA扩增方法及其使用的试剂盒无效

专利信息
申请号: 200480006237.5 申请日: 2004-03-05
公开(公告)号: CN1759191A 公开(公告)日: 2006-04-12
发明(设计)人: 桥口智史;猪濑健 申请(专利权)人: 爱科来株式会社
主分类号: C12Q1/68 分类号: C12Q1/68
代理公司: 中国专利代理(香港)有限公司 代理人: 郭文洁;王景朝
地址: 日本*** 国省代码: 日本;JP
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摘要: 一种使用正义引物和反义引物通过PCR扩增DNA的方法,该方法在存在如上附加引物的条件下进行:具有寡脱氧核苷酸的附加正义引物,所述寡脱氧核苷酸具有连接到所述正义引物的5′末端的第一附加序列,以及具有寡脱氧核苷酸的附加反义引物,所述寡脱氧核苷酸具有连接到所述反义引物的5′末端的与所述第一附加序列互补的第二附加序列,其中所述附加序列的Tm值低于所述正义引物和反义引物的Tm值,以及在PCR中最初将退火温度控制在所述附加序列无法退火的水平,然后控制在所述附加序列互相退火的水平。
搜索关键词: dna 扩增 方法 及其 使用 试剂盒
【主权项】:
1.一种包含使用正义引物和反义引物进行PCR扩增DNA的方法,其中PCR在存在如下附加引物的条件下进行:附加正义引物,其包含所述正义引物和一种具有第一附加序列并连接到所述正义引物的5′末端的寡脱氧核苷酸,以及附加反义引物,其包含所述反义引物和一种具有与所述第一附加序列互补的第二附加序列并连接到所述反义引物的5′末端的寡脱氧核苷酸;所述附加序列的Tm值低于所述正义引物和反义引物的Tm值;以及在PCR中退火温度最初设定为所述附加序列无法退火的温度,并在PCR过程中改变至所述附加序列互相退火的温度。
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