[发明专利]新型腈水合酶

摘要

本发明的目的在于提供使用除了保持热稳定性之外，还能在作为底物的腈化合物或作为生成物的酰胺化合物的高浓度存在下也保持高活性的腈水合酶制造酰胺化合物的方法。本发明在对来自于自然界的表达目的腈水合酶的新的微生物进行探索，在制备该微生物菌体以及该菌体处理物的同时，还克隆了该基因，制备了用异种微生物进行表达的重组微生物。如果利用本发明，即使在高温条件下、以及高浓度的腈化合物或高浓度的酰胺化合物存在下的反应中也可以有效地将腈化合物转变为酰胺化合物。

主权项

1.一种DNA，其特征为所编码的蛋白质具有以下理化性质：(a)具有腈水合酶活性；(b)底物特异性：以丙烯腈、己二腈、乙腈、异丁腈、n-戊腈、n-丁腈、苄腈、己腈作为底物，表现出活性；(c)分子量：作为至少由以下2种亚基构成的蛋白质，各亚基经还原型SDS-聚丙烯酰胺电泳确定的分子量如下：亚基α分子量 25000±2000亚基β分子量 28000±2000(d)热稳定性：当将水溶液中的酶于70℃温度下加热30分钟后，残存活性为加热前活性的35％以上；(e)即使用6重量％的丙烯腈作为底物，与6重量％以下底物浓度时相比，活性也没有减少；(f)即使在35重量％的丙烯酰胺水溶液中，仍具有以丙烯腈作为底物的活性。