[发明专利]siRNA表达系统无效
申请号: | 200480019454.8 | 申请日: | 2004-07-09 |
公开(公告)号: | CN1820074A | 公开(公告)日: | 2006-08-16 |
发明(设计)人: | I·博佐尼;M·A·登蒂;A·罗萨 | 申请(专利权)人: | 罗马“智慧”大学 |
主分类号: | C12N15/11 | 分类号: | C12N15/11;C12N15/85;A61K31/713 |
代理公司: | 中国国际贸易促进委员会专利商标事务所 | 代理人: | 陈轶兰 |
地址: | 意大*** | 国省代码: | 意大利;IT |
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摘要: | 本发明人描述了可在哺乳动物细胞中正确、稳定并有效表达siRNA的表达系统,其包括:a)来源于U1 RNA基因的聚合酶II RNA-依赖型启动子;该序列下游b)用于克隆转录前-siRNA的序列的合适的限制性位点;所述位点下游c)来源于U1 snRNA基因3’端序列的序列,其对于正确形成前siRNA的3’端是必须且足够的。 | ||
搜索关键词: | sirna 表达 系统 | ||
【主权项】:
1、用于在哺乳动物细胞中正确、稳定并有效表达siRNA或miRNA的重组载体,其从5’到3’包括:a)来源于U1 snRNA基因的RNA聚合酶II依赖型启动子序列;b)用于克隆转录前-siRNA或前-miRNA的序列的合适的限制性位点;c)转录前-siRNA的序列,其包括在第+1位的A或G残基;对应于由将被沉默的基因转录的mRNA有义区域的21到23个核苷酸的序列,其构成前-siRNA茎干的第一个部分;从前-miRNA序列选择的序列,其构成前-siRNA的环状区域;对应于由将被沉默的基因转录的mRNA反义区域的21到23个核苷酸的序列,其构成前-siRNA茎干的第二个部分;两个最后的残基UU,其突出的方式使得得到下列结构:
或备选地为转录前-miRNA的序列;d)来源于U1 snRNA基因3’端序列的终止序列,其对于正确形成前-siRNA或前-miRNA的3’端是必须且足够的。
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