[发明专利]耐热化蔗糖磷酸化酶(SP)的方法有效
申请号: | 200480025320.7 | 申请日: | 2004-08-31 |
公开(公告)号: | CN1845990A | 公开(公告)日: | 2006-10-11 |
发明(设计)人: | 藤井和俊;饭干雅惠;柳濑美千代;高田洋树;鹰羽武史;栗木隆 | 申请(专利权)人: | 江崎格力高株式会社 |
主分类号: | C12N9/10 | 分类号: | C12N9/10;C12N15/54;C12P19/02;C12P19/04 |
代理公司: | 北京集佳知识产权代理有限公司 | 代理人: | 顾晋伟;刘继富 |
地址: | 日本大阪*** | 国省代码: | 日本;JP |
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摘要: | 提供通过修饰天然SP获得的耐热蔗糖磷酸化酶和制备所述耐热化SP的方法。与天然蔗糖磷酸化酶相比,所述耐热SP在下列位置中至少一个位置的氨基酸残基不同:分别对应于基序序列1的第14位、第29位和第44位的位置、对应基序序列2的第7位、第19位、第23位和第34位的位置以及对应基序序列3的第19位的位置;并且在20mM Tris缓冲液(pH7.0)中于55℃加热20分钟以后,所述耐热SP在37℃的酶活性是未加热耐热SP在37℃的酶活性的20%或更多。 | ||
搜索关键词: | 耐热 蔗糖 磷酸化酶 sp 方法 | ||
【主权项】:
1.耐热化蔗糖磷酸化酶,其通过修饰天然蔗糖磷酸化酶获得,其中所述耐热化蔗糖磷酸化酶在选自下组的至少一个位置上具有与天然蔗糖磷酸化酶的氨基酸残基不同的氨基酸残基:与基序序列1:AVGGVHLLPFFPSTGDRGFAPIDYIIEVDSAFGDWDDVKRLGEKYYLMFDFMINIIIS中第14位对应的位置、第29位对应的位置和第44位对应的位置;与基序序列2:RPTQEDVDLIYKRKDRAPKQEIQFADGSVEIILWNTFGEEQID中第7位对应的位置、第19位对应的位置、第23位对应的位置和第34位对应的位置;以及与基序序列3:ILPEIHEHYTIQFKIADHDYYVYDFALPMVTLYSLYSG中第19位对应的位置;并且其中所述耐热化蔗糖磷酸化酶在20mM Tris缓冲液(pH7.0)中于55℃加热20分钟后,所述耐热化蔗糖磷酸化酶在37℃的酶活性为加热之前所述耐热化蔗糖磷酸化酶在37℃酶活性的20%或更多。
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