[发明专利]用于在转基因生物中产生多不饱和脂肪酸的方法

摘要

本发明涉及通过向生物导入编码具有Δ5－延伸酶活性的多肽的核酸用于在这种生物中产生多不饱和脂肪酸的方法。有利地，这些核酸序列可在这种生物中表达，根据需要这些核酸序列可与编码脂肪酸或脂类代谢中的其它编码多肽的核酸序列共同在这种生物中表达。编码Δ6－去饱和酶、Δ5－去饱和酶、Δ4－去饱和酶和/或Δ6－延伸酶活性的核酸序列尤其有利。这些去饱和酶和延伸酶有利地源自海链藻属、裸藻属或Ostreococcus。本发明还涉及用于产生具有长链多不饱和脂肪酸含量升高的油和/或三酰甘油酯的方法。在优选的实施方案中，本发明进一步涉及用于产生不饱和ω3－脂肪酸的方法和涉及用于产生具有不饱和脂肪酸，尤其具备超过3个双键的ω3－脂肪酸含量升高的三酰甘油的方法。本发明涉及转基因生物的产生，优选地涉及转基因植物或转基因微生物的产生，其中所述转基因生物由于本发明方法中所用的延伸酶和去饱和酶的表达，有利地与ω3－去饱和酶例如来源于腐霉科(Pythiaceae)例如疫霉属(Phytophthora)比如致病疫霉属或种的真菌的ω3－去饱和酶或源于如草绿藻科例如Ostreococcus属尤其Ostreococcus tauri属和种的藻类或海链藻属尤其假矮海链藻(Thalassiosira pseudonana)属和种的硅藻的ω3－去饱和酶共同表达，具有含量升高的具备ω3－双键的不饱和ω3－脂肪酸、油或脂类。本发明进一步涉及核酸序列、包含本发明核酸序列的核酸构建体、载体和生物、包含所述核酸序列和/或核酸构建体的载体并且涉及包含以上提到的核酸序列、核酸构建体和/或载体的转基因生物。本发明的其它部分涉及由本发明方法产生的油、脂类和/或脂肪酸并涉及它们的用途。本发明进一步涉及不饱和脂肪酸和涉及具有不饱和脂肪酸含量升高的三酰甘油并且涉及它们的用途。

主权项

1.用于在转基因生物中产生式I化合物的方法，其中基于所述转基因生物的总脂类含量，这种转基因生物具有至少1％重量的式I化合物含量，所述方法包括如下步骤：a)将至少一个编码Δ9延伸酶或Δ6去饱和酶活性的核酸序列导入生物体，以及b)将至少一个编码Δ8去饱和酶或Δ6延伸酶活性的核酸序列导入生物体，以及c)将至少一个编码Δ5去饱和酶活性的核酸序列导入生物体，以及d)将至少一个编码Δ5延伸酶活性的核酸序列导入生物体，以及e)将至少一个编码Δ4去饱和酶活性的核酸序列导入生物体，并且其中式I的变量和取代基的含义如下：R¹＝羟基、辅酶A(硫酯)、溶血磷脂酰胆碱、溶血磷脂酰乙醇胺、溶血磷脂酰甘油、溶血二磷脂酰甘油、溶血磷脂酰丝氨酸、溶血磷脂酰肌醇、鞘碱或式II的基团，其中R²＝氢、溶血磷脂酰胆碱、溶血磷脂酰乙醇胺、溶血磷脂酰甘油、溶血二磷脂酰甘油、溶血磷脂酰丝氨酸、溶血磷脂酰肌醇或者饱和或不饱和的C₂-C₂₄烷基羰基，R³＝氢、饱和或不饱和的C₂-C₂₄烷基羰基，或R²和R³彼此独立地是式Ia的基团：其中n＝2、3、4、5、6、7或9，m＝2、3、4、5或6并且p＝0或3。