[发明专利]流感免疫原和疫苗

摘要

公开了嵌合的、羧基末端截短的乙型肝炎核壳(HBc)蛋白，其含有用于诱导流感M2蛋白的抗体生成的免疫原。2－4个拷贝的免疫原性流感序列优选在N－末端上或N－末端附近，或在HBc免疫原性环序列中表达。HBc嵌合体优选含有流感特异性T细胞表位，并且优选经过工程化以便增强自组装颗粒的稳定性并且增强所述嵌合颗粒的产率。也公开了制备和使用所述嵌合体的方法。

主权项

1.长度为大约150-大约375个氨基酸残基的重组乙型肝炎病毒核心(HBc)蛋白嵌合体分子，包括4个通过肽键连接的氨基酸残基序列结构域，从N-末端开始命名为结构域I、II、III和IV，其中(a)结构域I包含(i)大约75-大约160个氨基酸残基，其序列至少包含HBc的第4位到大约75位的残基的序列，(ii)在嵌合体分子中相对于SEQ ID NO：1的HBc的N-末端的大约1-大约-55的位置上存在的1-3个半胱氨酸残基[N-半胱氨酸残基]，所述一个或多个N-半胱氨酸残基存在于除HBc的前核心序列的序列之外的序列中，和(iii)包含SEQ ID NO：9的甲型流感M2多肽的大约6-大约24个残基的2-4个序列，所述多肽与HBc序列的N-末端的大约15个残基通过肽键连接，或通过肽键连接在HBc序列的N-末端的大约15个残基内；(b)结构域II包含通过肽键与大约75号残基连接的大约0-大约60个氨基酸残基，其中包含(i)HBc的76-85位的序列中的0-所有残基，和(ii)具有大约6-大约48个残基的任选序列，其构成SEQ ID NO：9的甲型流感M2多肽的一个或多个具有大约6-大约24个残基的重复序列；(c)结构域III是通过肽键连接于大约85号残基的HBc序列的大约86位到大约135位；和d)结构域IV包含(i)通过肽键连接于结构域III的大约135位残基的大约136-140位残基加上HBc氨基酸残基序列从141-156位的最多16个残基，(ii)0-3个半胱氨酸残基，和(iii)与HBc的156位到C-末端异源的序列中的最多约100个氨基酸残基；所述嵌合体分子(i)HBc序列中包含不超过10％的保守取代的氨基酸残基，(ii)自组装为基本不与宿主细胞上表达的核酸结合的颗粒，这些颗粒比由缺乏所述N-末端半胱氨酸残基或嵌合体分子中存在的N-末端半胱氨酸被其它残基替代的其它方面相同的HBc嵌合体形成的颗粒在形成时更稳定。