[发明专利]一种硫酸盐还原菌直接倍比稀释PCR快速定量检测方法无效
| 申请号： | 200510010459.0 | 申请日： | 2005-10-21 |
| 公开（公告）号： | CN1769472A | 公开（公告）日： | 2006-05-10 |
| 发明（设计）人： | 马放;魏利 | 申请（专利权）人： | 哈尔滨工业大学 |
| 主分类号： | C12Q1/25 | 分类号： | C12Q1/25;C12Q1/04;C12Q1/68 |
| 代理公司： | 哈尔滨市松花江专利商标事务所 | 代理人： | 张伟 |
| 地址： | 150090黑龙江省哈尔滨*** | 国省代码： | 黑龙江;23 |
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| 摘要： | 一种硫酸盐还原菌直接倍比稀释PCR快速定量检测方法，涉及水处理过程中硫酸盐还原菌(SRB)的定量检测方法。现在检测方法存在检测周期较长、不能有效的和即时的指导生产实践和检测费用较高等缺点。本发明依次包括以下步骤：(1).制备“菌体前处理缓冲液”；(2).菌体的制备；(3).倍比稀释；(4).进行冰上的PCR操作；(5).PCR在扩增仪上的扩增；(6).扩增产物于1.0％的琼脂糖电泳检测；(7).结果观察，查表记数。本发明所述方法记数结果准确、可有效的缩短计数时间、真实的反映生产实际情况、降低检测费用，利于推广应用。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 硫酸盐 还原 直接 稀释 pcr 快速 定量 检测 方法 | ||
【主权项】：
1.一种硫酸盐还原菌直接倍比稀释PCR快速定量检测方法，其特征在于它依次包括以下步骤：(1).制备菌体前处理缓冲液；(2).菌体的制备；(3).倍比稀释；(4).进行冰上的PCR操作；(5).PCR在扩增仪上的扩增；(6).1.0％的琼脂糖电泳检测；(7).结果观察，查表记数；所述“(4).进行冰上的PCR操作”过程中的PCR反应体系为20μl：包括：Buffer(10×)2μl、0.3mmol·L-1的d NTP 2μl、浓度为0.1μmol·L-1 的正向引物SRBF1μl、浓度为0.1μmol·L-1的反向引物SRBR1μl，rTaq酶0.3U，其余加去离子水11.7μl，然后加2μl的样品。
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