[发明专利]二步树脂法制备河豚毒素的方法及河豚毒素制剂

摘要

本发明公开了一种工厂规模化生产河豚毒素的制备方法。原料为河豚鱼内脏，采用一种提取罐提取、二步树脂法纯化和二次结晶生产工艺，得以使河豚毒素产品达到工厂规模化生产。生产过程中操作安全、简便，获得的产品质量高，产品收率高，产品纯度达到96％－99％。符合作为医学临床应用和生物试剂应用所需的品质质量。二步树脂法生产河豚毒素的制备方法，适用河豚毒素产品的批量生产。其产品可作为临床戒断生物碱类成瘾性依赖药物综合症(戒毒)用药，以及可作为镇痛用药替代吗啡、度冷丁等。还可作为解痉、镇静、局部麻醉、抗瘙痒、及心动过速和降血压等临床用药。同时也可作为离子通道阻断作用研究的生物试剂。

主权项

1、一种二步树脂法制备河豚毒素的方法，其特征是该方法包括下述步骤：1)将河豚鱼内脏破碎，加去离子水低温搅拌下提取，得提取混合液，将其加热以凝固蛋白、吊滤去除固形物，获得微黄色初毒液；2)初毒液经非极性吸附树脂树脂搅拌吸附，搅拌速度10-30转/分钟，吸附5小时；吸附完毕后，滤出树脂，获无杂质粗毒液；3)将粗毒液上树脂柱，经离子交换型树脂树脂吸附，吸附完毕经水洗后，以4％醋酸溶液pH＝3.5为洗脱液，进行洗脱；收集高浓馏份，获得的液体，即河豚毒素粗品；4)将所得的液体河豚毒素粗品进行低温减压浓缩，浓缩至小体积，得高浓度河豚毒素液；5)调节所得高浓度河豚毒素液pH＝7.5-9.0，使达到等电点，置低温条件下静置获得河豚毒素结晶；6)将所得河豚毒素结晶用无机或有机酸性试剂溶解，并再用碱性试剂调pH＝7.5-9.0，达到等电点，将产品再次结晶纯化，获得的结晶产品经干燥后，即为所需的河豚毒素产品。