[发明专利]毛形属线虫疫苗的制备方法及医用用途无效
申请号: | 200510016689.8 | 申请日: | 2005-04-06 |
公开(公告)号: | CN1843510A | 公开(公告)日: | 2006-10-11 |
发明(设计)人: | 张西臣;李建华;王静敏;宫鹏涛 | 申请(专利权)人: | 张西臣 |
主分类号: | A61K48/00 | 分类号: | A61K48/00;A61K39/00;A61P37/04;A61P33/14 |
代理公司: | 吉林长春新纪元专利代理有限责任公司 | 代理人: | 陈宏伟 |
地址: | 130062吉林省*** | 国省代码: | 吉林;22 |
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摘要: | 本发明提供一种毛形属线虫疫苗,包括其核酸疫苗及基因工程苗的制备方法:将毛形属线虫RNA提取,分离纯化,合成cDNA第一条链及第二条链,将cDNA与ECORI适配子连接并对连接产物磷酸化,后分离cDNA片段,并与λZAP载体连接,进行噬菌体包装,提取λ噬菌体DNA,并进行cDNA文库插入片段检测,获得毛形属线虫cDNA表达文库。将筛选的功能性基因与真核基因表达载体连接,构建重组质粒,制备毛形属线虫核酸疫苗:将功能性抗原基因与原核表达载体连接,转化DH5α菌,转化大肠杆菌,进行高效表达,获得毛形属线虫基因工程疫苗。本发明产品可用于肿瘤疾病,性功能低下等免疫功能低下或缺陷引起疾病的预防和治疗。 | ||
搜索关键词: | 毛形属 线虫 疫苗 制备 方法 医用 用途 | ||
【主权项】:
1、毛形属线虫疫苗的制备方法,包括以下步骤:首先获得纯净的毛形属线虫,然后提取RNA,分离纯化mRNA,合成cDNA第一条链及cDNA第二条链,将cDNA与ECORI适配子连接并对连接产物磷酸化,后分离cDNA片段,并与λZAP载体连接,进行噬菌体包装,测定所构建cDNA文库滴度及重组率后进行文库扩增,提取λ噬菌体DNA,并进行cDNA文库插入片段检测,获得毛形属线虫cDNA文库;利用抗体或探针筛选功能性抗原基因,将筛选的功能性基因与真核基因表达载体连接,构建重组质粒,获得毛形属线虫核酸疫苗。
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