[发明专利]川草二号老芒麦转抗虫基因技术

摘要

本发明提供了一种川草二号老芒麦转抗虫基因的技术，按照本技术，以川草二号老芒麦成熟胚为外植体，进行了愈伤组织再生、农杆菌介导的抗虫基因转化及转基因植株的抗虫性研究，建立了高效的愈伤组织再生体系；进行了遗传转化条件的研究，获得的抗性愈伤组织以体细胞胚发生途径形成再生植株，经过分子鉴定和抗虫性实验，获得了抗虫转基因川草二号老芒麦植株。抗虫转基因川草二号老芒麦具有抗蝗虫特性，在我国草原畜牧业发展、防止草地沙化等方面有广阔的市场前景。

主权项

1、一种川草二号老芒麦抗虫转基因技术，包括(1)外植体制备；(2)所述外植体在含5.0mg/L2，4-D和0.05mg/L激动素的MS培养基上诱导出愈伤组织，愈伤组织继代培养8周之后，选择黄白色、颗粒状的胚性愈伤组织，在1/4MS+2，4·D5.0mg/L+100μM乙酰丁香酮+2％蔗糖+1％葡萄糖+1.0％琼脂粉，pH5.6的培养基上预培养4天，然后用含目标基因表达载体的农杆菌菌液浸染；(3)在含40mg/L潮霉素选择压的所述培养基上筛选抗性愈伤组织并除去农杆菌；(4)在含1.5mg/L2，4-D、0.1mg/L激动素和40mg/L潮霉素的所述培养基上诱导愈伤组织体细胞胚；(5)体细胞胚萌发，利用40mg/L潮霉素来筛选抗性转基因再生苗；(6)对转化后获得的抗性苗进行分子检测。