[发明专利]鱼类分子生物学快速鉴别方法无效
申请号: | 200510022323.1 | 申请日: | 2005-12-19 |
公开(公告)号: | CN1789974A | 公开(公告)日: | 2006-06-21 |
发明(设计)人: | 侯一平;袁万安;李英碧;吴谨;颜静;张霁 | 申请(专利权)人: | 四川大学 |
主分类号: | G01N21/00 | 分类号: | G01N21/00;G01N27/447;C12Q1/68;B01D57/02 |
代理公司: | 成都博通专利事务所 | 代理人: | 谢焕武 |
地址: | 610041四*** | 国省代码: | 四川;51 |
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摘要: | 一种鱼类分子生物学快速鉴别方法,其特征是按以下步骤进行:(1)设计“目”的所有鱼类通用引物对;(2)采用通用引物对,对该“目”中的各种鱼的DNA样本进行扩增;(3)选出每一种鱼的与其它鱼种有差异的DNA片段;(4)为每一种鱼分别设计并筛选出一条特异引物;(5)用通用引物对中的一条引物分别与每一种鱼的特异引物配对,构成每一种鱼的“引物对”;(6)分别对每一种鱼的DNA样本进行PCR扩增;将所得到的扩增产物相混合,作为分型标准物;(7)将通用引物对和每一种鱼的一条特异引物相混合,构成混合引物;(8)采用混合引物,对需要鉴别的鱼类DNA样本进行扩增;(9)根据扩增产物的电泳条带的对比,得到鉴别结果。 | ||
搜索关键词: | 鱼类 分子生物学 快速 鉴别方法 | ||
【主权项】:
1、一种鱼类分子生物学快速鉴别方法,其特征是按以下步骤进行:(1)、设计并筛选出一对特异针对鱼类某一个“目”的核糖体DNA的引物,作为这个“目”的所有鱼类通用引物对;(2)、采用步骤(1)中的通用引物对,对该“目”中的各种鱼的DNA样本分别进行PCR扩增,得出该“目”的各种鱼的PCR扩增产物;(3)、分别对上一步骤所得到的各种鱼的PCR扩增产物测序,根据测序结果选出每一种鱼的一个与其它鱼种有差异的DNA片段;(4)、在上一步骤所选出的DNA片段的区域内,为该“目”中的每一种鱼分别设计并筛选出一条特异引物;(5)、用步骤(1)所得到的同一“目”鱼类通用引物对中的一条引物分别与该“目”中的每一种鱼的特异引物配对,构成该“目”中的每一种鱼的“引物对”;(6)、使用上一步骤所得到的每一种鱼的“引物对”,分别对该“目”中的每一种鱼的DNA样本进行PCR扩增;将所得到的该“目”中的各种鱼的PCR扩增产物相混合,作为分型标准物;(7)、将步骤(1)中所得的通用引物对和步骤(4)中得到的每一种鱼的一条特异引物相混合,构成混合引物;(8)、采用上一步骤所得到的混合引物,在PCR反应体系中对需要鉴别的鱼类DNA样本进行扩增;(9)、让上一步骤所得到的扩增产物和所述分型标准物在琼脂糖凝胶上进行电泳,根据需要鉴别的鱼类DNA扩增产物的电泳条带与分型标准物的电泳条带的对比,得到鉴别结果。
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