[发明专利]番茄纯合体的快速培育方法

摘要

一种番茄纯合体的快速培育方法，通过细胞学观察选取适宜花药进行培养；将花药接种于MS基本培养基+激动素KT+萘乙酸NAA+蔗糖+琼脂的培养基进行愈伤组织的诱导培养；将具有一定大小的愈伤组织接种于MS+苄基腺嘌呤BA+吲哚乙酸IAA+蔗糖+琼脂的培养基上进行分化培养；切取分化的小植株，再接入MS+IAA+蔗糖的生根培养基中进行生根培养，获得完整植株；再用简单序列重复SSR分子标记验证筛选出纯合体。本发明与传统育种技术相比，大大缩短了育种周期，利用SSR分子标记检测纯合体可提高检测效率，且不会丢失自然加倍的纯合二倍体。

主权项

1、一种番茄纯合体的快速培育方法，其特征在于包括如下步骤：1)将不同长短的番茄花药用碘-碘化钾染色压片检查花粉发育时期，以确定用于花药培养所需要的适宜花药；2)于晴天10:00-15:00采集6-8mm长的花蕾，置于4℃预处理2-5天，接种前将花蕾用70％酒精消毒30秒，再用饱和的漂白粉消毒5-7分钟，然后经无菌水冲洗，在无菌条件下将花药从花蕾取出，选取2-5mm长的花药用于花药培养，花药内的花粉发育时期为单核期；3)将上述花药接种于MS培养基附加激动素KT1.0mg/L、萘乙酸NAA0.5mg/L、蔗糖4％、琼脂0.7％、pH5.8的培养基进行愈伤组织诱导培养，培养室的条件：25±1℃，光强25μmol.m-2.s-1，10小时光/14小时暗的光周期；4-8周后，当愈伤组织大小为2-3mm时，将其接种于MS培养基附加苄基腺嘌呤BA2.0mg/L、吲哚乙酸IAA0.2mg/L、蔗糖2％、琼脂0.7％、pH5.8的培养基中进行分化培养，培养室的条件：25±1℃，光强25μmol.m-2.s-1，14小时光/10小时暗的光周期；4)分化培养4周，当愈伤组织分化出小植株时，切取小植株，并将其接入MS+IAA0.2mg/L+蔗糖2％的生根培养基中，进行生根培养，获得完整植株；5)SSR分子标记检测筛选出纯合体。