[发明专利]冻存胚胎干细胞的复苏方法有效
| 申请号： | 200510024978.2 | 申请日： | 2005-04-08 |
| 公开（公告）号： | CN1844371A | 公开（公告）日： | 2006-10-11 |
| 发明（设计）人： | 曹谊林;丛笑倩;王彦;唐郑雅;吴春芳;张文杰;刘伟;崔磊 | 申请（专利权）人： | 上海组织工程研究与开发中心 |
| 主分类号： | C12N5/06 | 分类号： | C12N5/06;C12N5/08 |
| 代理公司： | 上海专利商标事务所有限公司 | 代理人： | 徐迅 |
| 地址： | 200233*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种对冻存胚胎干细胞进行复苏的方法，该方法包括在复苏过程中，添加含一定浓度的糖类物质的复苏液。该方法可显著提高复苏干细胞的存活率(可使复苏成活率提高到42％左右)，且重复性好。 | ||
| 搜索关键词： | 胚胎 干细胞 复苏 方法 | ||
【主权项】：
1.一种冻存的干细胞进行复苏的方法，其特征在于，包括步骤：(a)将冻存于液氮的干细胞，置于37±5℃的水浴中，以60-120℃/分钟的速度升温至4-20℃，从而使冻存的干细胞溶解；(b)将溶解后的干细胞加至37±2℃复苏液，所述的复苏液是含0.05-0.5mol/L糖类物质的hES培养液；(c)离心去除上清，将干细胞转移到小鼠胚胎成纤维细胞的饲养层上，在含0.05-0.25mol/L糖类物质的hES培养液中，于37±2℃下培养0.25-5小时；(d)将培养液换成hES培养液继续培养。
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