[发明专利]一种重组人复合α干扰素的制备方法有效
| 申请号： | 200510028285.0 | 申请日： | 2005-07-29 |
| 公开（公告）号： | CN1733929A | 公开（公告）日： | 2006-02-15 |
| 发明（设计）人： | 储炬;郝玉有;张嗣良;庄英萍;史琪琪;王永红;杭海峰;刘志敏;杨士珍;吴康华 | 申请（专利权）人： | 华东理工大学 |
| 主分类号： | C12P21/02 | 分类号： | C12P21/02;C12N15/20 |
| 代理公司： | 上海顺华专利代理有限责任公司 | 代理人： | 陈淑章 |
| 地址： | 200237*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种经真核表达制备重组人复合α干扰素(cIFN)制备方法，其主要步骤是：将酵母工程菌(Pichiapastoris GS115/pPIC9K－CIFN)经种子培养、发酵罐培养、外源蛋白诱导表达及目标蛋白纯化后获得cIFN，其特征在于，在外源蛋白诱导表达启动时加入Tween－20、Tween－80、SDS、Triton X－100、Triton X－114、NP－40、CHAPS、Zwittergent3－14、LiDS、胆酸钠、脱氧胆酸钠、辛匍糖苷或/和Brij35，加入量为0.01～10g/L发酵液；外源蛋白诱导表达的温度控制在20～30℃；外源蛋白诱导表达时发酵液的pH值控制在3.0～7.0且发酵液中的甲醇含量控制在1.0～10.0g/L发酵液。本发明不仅实现了cIFN的高密度高发酵表达，而且使cIFN在发酵液中维持了正确的单体分子状态和生物活性，大大抑制了cIFN聚合体和降解产物的形成。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 重组 复合 干扰素 制备 方法 | ||
【主权项】：
1、一种重组人复合α干扰素(cIFN)制备方法，其主要步骤是：将酵母工程菌(Pichiapastoris GS115/pPIC9K-cIFN)经种子培养、发酵罐培养、外源蛋白诱导表达及目标蛋白纯化后获得cIFN，其特征在于，在外源蛋白诱导表达启动时加入Tween-20、Tween-80、SDS、TritonX-100、Triton X-114、NP-40、CHAPS、Zwittergent3-14、LiDS、胆酸钠、脱氧胆酸钠、辛匍糖苷(Octylglucoside)或/和Brij35，加入量为0.01～10g/L发酵液；外源蛋白诱导表达的温度控制在20～30℃；外源蛋白诱导表达时发酵液的pH值控制在3.0～7.0且发酵液中的甲醇含量控制在10g/L发酵液以下。
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