[发明专利]胶原蛋白海绵的制备工艺

摘要

本发明涉及一种胶原蛋白海绵的制备工艺，从提取到透析的过程都是在0～15℃的温度条件下进行，用1～5％的醋酸为溶剂用胃蛋白酶消化24～72小时提取胶原蛋白，过滤后取上清液，用10mol/l的氢氧化钠中和，然后加氯化钠溶液至1.25～5mol/l将胶原蛋白盐析，离心取沉淀物，用0.5～2％醋酸溶解，待完全溶解后，用0.01～0.1％醋酸作为透析外液透析2天，再用pH为5～7左右的磷酸氢二钠溶液作为透析外液透析至pH达到5.0以上，然后用冻干机冷冻干燥24～36小时左右制得胶原蛋白海绵。本发明的优点是胶原蛋白海绵质地柔韧、粘附性好、盐分含量低，提高了临床应用效果。

主权项

1.一种胶原蛋白海绵的制备工艺，其特征在于，以醋酸为溶剂，其工艺为：第一步.牛跟腱碎片的准备将洗净的牛跟腱切片放入组织捣碎机中，加入适量的冷蒸馏水，开机使牛跟腱捣成碎片，挑出筋膜，并用冷蒸馏水洗涤，用生理盐水浸洗1-2小时，取出置于绢丝中挤干；第二步.胶原蛋白的提取将1份挤干的牛跟腱碎片置于玻璃缸中，加入1～5％醋酸4～8份，让其溶胀，再加入含氯化钠10～15g的1～5％醋酸5～10份，并用搅拌机搅拌15-30min，再加入含有2-10克胃蛋白酶的1～5％醋酸5～10份，使其搅拌均匀；消化开始后，根据消化的情况再适当加入醋酸溶液，继续消化，整个消化过程时间为2-5天；第三步 过滤将消化液用不锈钢过滤器过滤两次，第一次用粗过滤网过滤，去掉粗的沉淀物，将经过粗过滤后的胶原溶液再进行精过滤；第四步 盐析首先将胶原消化液用5～12mol/L的NaOH溶液调节PH到7-9，在调节过程中必须充分搅拌，使整个溶液均匀；然后加入NaCl溶液，至氯化钠浓度达到2～3mol/l，边加氯化钠边搅拌，在加入完毕后搅拌待沉淀析出后，静止过夜；最后取出沉淀离心，去除上清液，将沉淀用1％的醋酸溶液洗涤，并作1-5分钟的停留，用绢丝挤干；洗涤的次数和程度可根据沉淀物的膨胀和透明度来判断，一般以胶原沉淀开始溶解为标准；第五步 溶解将沉淀物溶解在1％的醋酸溶液中；第六步 透析首先将胶原溶液装入透析袋中，用0.1％的醋酸溶液作为透析外液，每次透析外液的体积是内液体积的4～6倍，一天至少更换一次，透析两天；然后将透析袋外面用冷的蒸馏水冲洗后置于磷酸氢二钠透析外液中透析至胶原蛋白溶液的PH为5.0以上，同时在透析过程中每次所用的透析外液体积必须是内液的4～6倍，每天必须更换外液；第七步 冷冻干燥将透析好的胶原溶液用注射器注入无热原的冻干用的不锈钢盘中，每盘15～20ml，用冻干机冷冻干燥24～48小时，制得胶原蛋白海绵；第八步 包装在出柜前开启冻干出柜间的去湿机，使得在出柜时的湿度低于40％，将胶原海绵装入泡罩中，盖铝泊纸用泡罩热合机热合，然后装入铝泊袋中，用封口机封口，最后进行60Co辐照灭菌。