[发明专利]日本血吸虫SDISP基因及其克隆、表达和应用

摘要

本发明具体涉及日本血吸虫中国大陆株SDISP基因的基因序列及其克隆表达方法和应用。根据基因库中该基因对应的EST及日本血吸虫成虫cDNA文库载体λgt11多克隆位点邻近核苷酸序列设计引物，以成虫cDNA文库为模板，采用锚式PCR对SjSDISP基因不完整的3’端和5’端进行扩增、测序，用电子软件拼接全长序列。该基因的开放阅读框含834bp，编码278个氨基酸。将该基因亚克隆入原核表达载体pGEX－4T－1中，构建成重组质粒pGEX－4T－1/SjSDISP，转化大肠杆菌BL21后用IPTG诱导表达，以纯化的重组蛋白免疫昆明系小鼠，获得22.8％的减虫率和38.4％的减卵率。

主权项

1、一种编码日本血吸虫中国大陆株SDISP基因的核苷酸序列，其特征在于它具有如下核苷酸序列：ggtcagtaaa tttcatttca tacctcacag attttcagtt cgacatcaca gtatttgtgc 60gtgtttaata cctcgagaga caaaccacct ttattgaagt tcagaatgct gaagtctcta 120tctactttgc agtcagcatc cttcaaactt gttcgttatg tttcaactgc atcagagtta 180gcaccacgta ttaaaacgtt ttcaatctac agatggaacc cagacaaacc tggcgagaaa 240cctagtatgc agaattatca agttgacctc aacgactgtg gccctatggt cttggatgct 300ctaattaaga taaaaaatga acaagactcc actttgacat ttcgacgttc ttgtcgtgag 360gggatttgcg gttcttgtgc aatgaatata ggaggccgta atcatcttgc ttgcatatgg 420gaaatcgatc aagatgttag caaaccgact aaaatatatc cattaccgca catgtatgtt 480attaaggatc taattcctga tatgaacaat ttctatgctc aataccgttt tattgagcct 540tatttaaaga aaaagaatgt aactgaagaa gatattggga agaagactta ttatcagtca 600gtggaagaca gagcaaaact agatgggtta tacgagtgca ttctgtgtgc ctgctgctct 660acttcatgtc catcttattg gtggaatggt gataaatatt taggtcctgc agtcctcctc 720caggcttata gatggctagt tgattctcgt gatgactaca catacgagcg tctgtctgaa 780ttccagaaca aatggtcact ttatcgatgt catactatta tgaactgcac agaaacgtgt 840ccaaaaggac tgaatcctgg tttggccatt ggagaaatta agaaaatgtt aatctatttt 900aatcagtaca aggacaaaaa gccggagaca agaactgtct gaactgtgtg actgtttcgt 960ccacatattc gtccgaattt ggataacttt ttattgattg tttatagtga attcagccat 1020atcttctact ttttgattta acttatataa attcatagtc aaaaaaaaaa a 1071。