[发明专利]一种与预测心脑血管病发生相关的蛋白标志物的集成检测方法

摘要

本发明涉及与心脑血管病发生相关的蛋白标志物的检测技术。集成检测技术是指对同一样品一次检测多种与心脑血管病发生相关的蛋白标志物，本发明采用液相芯片法，在聚苯乙烯荧光微珠上包被心脑血管病事件相关蛋白质标志物的相应抗体，用来捕捉被测液体中对应的蛋白标志物，并利用各蛋白标志物的检测抗体来测定样品中各蛋白标志物的浓度，集成检测能在较短的时间内准确的获得多个指标的信息，与单一指标的免疫比浊法比较，灵敏度在80％以上，特异度在90％以上，因此集成检测可以为准确预测心脑血管病的发生提供全面的依据，明显提高对心脑血管病发生预测的准确率。

主权项

1、一种与预测心脑血管病发生相关的蛋白标志物的集成检测方法，包括相关蛋白标志物的确定，捕捉抗体的制备，检测抗体的制备以及样品的测定，本发明的特征在于：(1)检测样品采用的相关蛋白标志物为与心脑血管病相关的hs-CRP、Hcy、脂蛋白(a)、TpP、D-二聚体、纤维蛋白原和vWF中的三种或三种以上蛋白标志物；(2)捕捉抗体的制备，将确定的三种或三种以上蛋白标志物的单抗包被在聚苯乙烯荧光微珠固体基质上，用羊抗鼠IgG-生物素测定抗体的包被效率；(3)检测抗体的制备，另将上述三种或三种以上蛋白标志物另一不同抗原表位的单抗加入BAC-S-NHS，进行生物素标记，纯化后测定抗体含量，计算生物素标记效率；(4)样品的测定：[1]包被好抗体的蛋白标志物微珠悬液于96孔抽滤板的液相体系中，[2]抽滤板中分别加入血清样品或蛋白标志物不同浓度的抗原标准品，[3]加入生物素标记的蛋白标志物的检测抗体，[4]PE染色后液相蛋白芯片阅读仪检测。