[发明专利]一种呼吸道病原体的实时荧光聚合酶链式反应检测方法

摘要

本发明涉及一种呼吸道病原体的实时荧光聚合酶链式反应检测方法及其试剂盒。其方法特征在于，对GenBank中登录的相关的呼吸道病原体(包括A型流感病毒，B型流感病毒，呼吸道合胞病毒，肠道病毒，腺病毒，肺炎支原体，肺炎衣原体)的基因组核酸序列进行分析，根据各种病原体特异性和保守性高的碱基的聚集区域设计引物和探针；使用本发明所提供的试剂盒，从咽拭子样品提取病原体核酸；在引物和探针的存在下，在荧光PCR仪中，对提取的病原体核酸进行PCR扩增或RT－PCR扩增，从而实现呼吸道病原体的检测。

主权项

1、一种呼吸道病原体的实时荧光聚合酶链式反应检测方法，包括以下步骤：a.根据七种病原体的待检靶基因特异性核酸序列设计特异性的引物；b.根据七种病原体的待检靶基因特异性核酸序列位于引物之间的序列设计，合成各自的荧光探针；c.使用步骤a中的引物和步骤b中的探针及其他PCR或RT-PCR成份组成PCR或RT-PCR反应液；d.从待检样本中提取DNA或RNA，加入到PCR主反应液或RT-PCR主反应液中；e.将反应管放在自动荧光PCR仪中进行检测；f.检测程序结束后，综合分析仪器给出的各项数据，设定合理的阈值(Threshold)和基线(Baseline)，使仪器给出正确的结果，进行结果判断。