[发明专利]作物种子脂肪酶活性快速检测方法无效
申请号: | 200510037720.6 | 申请日: | 2005-01-27 |
公开(公告)号: | CN1680587A | 公开(公告)日: | 2005-10-12 |
发明(设计)人: | 张瑛;吴跃进;余增亮;王钰;佘德红;宋美 | 申请(专利权)人: | 中国科学院等离子体物理研究所 |
主分类号: | C12Q1/44 | 分类号: | C12Q1/44 |
代理公司: | 合肥华信专利商标事务所 | 代理人: | 余成俊 |
地址: | 230031安*** | 国省代码: | 安徽;34 |
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摘要: | 本发明公开了一种作物种子脂肪酶活性快速检测方法,是选取种子的脂肪酶的富集部位,配制粗酶液,在底物乳化液及其它试剂中反应,然后加异辛烷进行显色反应,并据此判定脂肪酶的活性。加乙酸铜指示剂,测量其吸光度,进行脂肪酶的量化测量。本发明方法也可用于水稻、大豆、玉米、油菜、花生等种子脂肪酶活性检测。可供农作物育种者在选择脂肪酶缺失和脂肪酶抑制酶活性高的材料、品系、品种中,根据脂肪酶酶活性有无判断脂肪酶或脂肪酶抑制酶基因的表达情况,决定该材料的利用价值。 | ||
搜索关键词: | 作物 种子 脂肪酶 活性 快速 检测 方法 | ||
【主权项】:
1、作物种子脂肪酶活性快速检测方法,包括以下步骤:(1)、取种子中的脂肪酶富集部位,用Tris-HCl缓冲液配制粗酶液;(2)、配制由橄榄油和异辛烷组成的底物乳化液;(3)、配制乙酸铜指示剂;(4)、底物乳化液在35℃下预热后,加入粗酶液、CaCl2溶液、NaCl溶液、Tris-HCl缓冲液,35℃水浴下搅拌至剧烈震荡,反应完毕后,加入HCl溶液,加热至沸腾,冷却后加异辛烷,再将溶液剧烈震荡混匀,静置后,观察颜色深浅,深则表示脂肪酶活性高,浅则表示脂肪酶缺失。
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