[发明专利]中国葡萄属野生种山葡萄抗黑痘病候选基因序列及应用

摘要

本发明公开了中国葡萄属野生种山葡萄抗黑痘病候选基因序列，包括中国葡萄属野生种山葡萄的泰山－11抗黑痘病候选3个基因序列和黑龙江实生的1个抗黑痘病候选基因序列。本发明采用抗病基因同源序列法(Resistantgeneanalogus，RGAs)获得中国葡萄属野生种山葡萄(V.amurensisRupr.)泰山－11、黑龙江实生2个株系抗黑痘病候选基因DNA片段4个，对这些片段克隆测序后，其大小介于468bp～513bp之间。以这些序列为依据，进行抗黑痘病标记辅助育种，用作葡萄育种中检测葡萄抗黑痘病基因的探针；根据这些片段在山葡萄与欧洲葡萄杂种后代中的分离情况，进行抗黑痘病基因定位与作图；或根据这些片段设计特异引物，采用cDNA末端快速扩增技术(Rapid amplification of cDNA ends，RACE)(Frohman et al，Proc.Natl.Acad.Sci，1988)克隆山葡萄抗黑痘病基因，为通过基因工程改良葡萄品种的抗病性奠定基础。

主权项

1.中国葡萄属野生种山葡萄抗黑痘病候选基因序列，其特征在于，包括中国葡萄属野生种山葡萄的泰山-11株系抗黑痘病候选3个基因序列和黑龙江实生株系的1个抗黑痘病候选基因序列；所述的中国葡萄属野生种山葡萄泰山-11株系抗黑痘病3个候选基因序列是：山葡萄泰山-11基因序列(1)1 GGGGTTGGTA AGACAACACT AGCAAAGTTG ATCTATCACA ATGATGCTGT TGTCAATCAT61 TTCCATTATC GTGCTTTTGG TTTTGAACTT CTCAAAGATG TCAGGAAACA GTTCGGAGAG121 CCAGGCTCTT CGATGTCACC AGAAAAAAGG GCGCAACCAT TCAAAGCTTT CTTGGCTGAT181 AAGAGGTGTC TCATAGTTCT GGATGATGCC CACGATGAAA GTTTCAAGAA TGAAATGATA241 ACAGCACTCC GGGACACATC AAATGGGTGT AGAATGATTT TGACATCTTG GGTTACAGAA301 CTACCATCAA ACCTCCAAAT AGGAAGTCTT TACTATGGAC TAAGACTACG AAGAGATGAT361 GAGAGTTGGG CATTGTTTAC CCATGCAATG AAGATAAGCA TACCCCAAGA ACTGCTAAAG421 TTTAGAAGGG AAATCGTGAG AAGATGTGGA GGATTGCCAC TAGCGTTG山葡萄泰山-11基因序列(2)1 GGGGTGGGTA AAACAACACT CGCACGACTG CTTTACAACG ATGACATGGC CAAAAACTTT61 AACCTAAAAG CATGGGTTTG TGTGTCTAAT GTGTTTGATG TGGAAAATAT AACAAAATCA121 ATTTTCAATT CAATGGTAAG TTCTGATGTA GGTGGCTCGT TCCAATAGGT TCAAAAAAAA181 TTGACAGAGG CATTGATAGG GAAAAAGTTT TTACTCATTC TAGACGATGT ATGGAACCAA241 GATTATGGTA GTTGGGATAG CTTGCGCCCT CCTTTTATTG GAGGTACAAA AGGAAGCAAA301 GTCATAGTCA CAACATGCAA TAAAAACGTT GCATTGATGA TGGGAGCTAA GGAGAAGGTT361 TATGAACTAA AAAATTTATC AAAAGATGCT TGTTGGTCGA TGTTTAAGAA GCATGCGTTT421 GAACATAGAA ATATTGATGA TCATCCAAAC CTAGTGTCTA TTGGTAGGAA ATTTGTTAGC481 AAGTGTGGTG GATTGCCACT AGCGTTG山葡萄泰山-11基因序列(4)1 GGGGTTGGTA AGACTACTCT CGCACGGCAG GTTTACAAGT ATGATTTGGC CAAAAATTTT61 GAACTAAAAG CGTGGGTTTG TGTGACTGAT GTGTTTGATG TGGAGAATAT AACAAAAGCA121 ATTCTCAATT CGGTGTTAGA GTCTGATGCA AGTGGCTCTT TGGACTTCCA ACAAGTTCAA181 AAGAAATTGA CAGACACGTT AGCAGGGAAA ACTTTTTTAC TCGTTCTAGA CGATGTGTGG241 AACGAAAATT GTGGTCATTG GGATCTTTTG CGGGCTCCTT TTAGTGTAGG GTCCAAAGGA301 AGCAAAGTCA TAGTTACAAC ACGCAATAAA AATGTCGCAT TGATGATGGG AGCTGCCAAG361 AATGTTCATG AACTAAACCC TTTATCTGAA GATGCTTGTT GGTCTGTGTT TCAGAAGCAT421 GCATTTGAAC ATAGAAATAT CAATGATCAT CCGAACCTGG TGTCCATTGG TAGGAAAATT481 GTTGGCAAAT GTGGTGGATT GCCACTAGCG TTG所述的中国葡萄属野生种山葡萄黑龙江实生株系抗黑痘病候选基因序列是：1 GGGGTTGGCA AGACAACTCT CGCACGGCAG GTTTACAAGT ATGATTTGGC CAAAATTTTG61 AACTAAAAGC GTGGGTTTGT GTGACTGATG TGTTTGATGT GGGGAATATA ACAAAAGCAA121 TTCTCAATTC GGTATTAGAG TCTGATGCAA GTGGCTCTTT GGACTTCCAA CAAGTTCAAA181 AGAAATTGAC AGACACGTTA GCAGGGAAAA CTTTTTTACT CGTTATAGAC GACGTGTGGA241 ACGAAAATTG TGGTCATTGG GATCTTTTGC GGGCTCCTTT TAGTGTAGGG TCCAAAGGAA301 GCAAAGTCAT AGTTACAACA CGCAATAAAA ATGTCGCATT GATGATGGGA GCTGCCAAGA361 ATGTTCATGA ACTAAACCCT TTATCTGAAG ATGCTTGTTG GTCTGTGTTT CAGAAGCATG421 CATTTGAACA TAGAAATATC AATGATCATC CGAACCTGGT GTCCATTGGC AGGAAAATTG481 TTGGCAAATG TGGTGGATTG CCACTAGCGT TG。