[发明专利]中国葡萄属野生种刺葡萄抗白粉病候选基因序列及应用

摘要

本发明涉及葡萄常规杂交育种、分子标记辅助育种、基因定位与作图及基因克隆的方法与技术。本发明采用抗病基因同源序列法(Resistant geneanalogus，RGAs)获得中国葡萄属野生种刺葡萄(V.davidii Foex)福建－4、塘尾2个株系抗白粉病候选基因DNA片段3个，对这些片段克隆测序后，其大小分别为507bp、513bp、513bp。以这些序列为依据，可以进行抗白粉病标记辅助育种，用作葡萄育种中检测葡萄抗白粉病基因的探针；可以根据这些片段在中国野生葡萄与欧洲葡萄杂种后代中的分离情况，进行抗白粉病基因定位与作图；也可以根据这些片段设计特异引物，采用cDNA末端快速扩增技术(Rapid amplification of cDNA ends，RACE)(Frohman etal，Proc.Natl.Acad.Sci，1988)克隆中国野生葡萄刺葡萄抗白粉病基因，为通过基因工程改良葡萄品种的抗病性奠定基础。

主权项

1.中国葡萄属野生种刺葡萄抗白粉病候选基因序列，其特征在于，包括福建-4、塘尾2个株系共3个中国葡萄属野生种刺葡萄抗白粉病候选基因序列，这些中国葡萄属野生种刺葡萄抗白粉病候选基因序列分别是：刺葡萄福建-4抗白粉病候选基因序列：1 GGGGTAGGGA AGACAACGCT CGCACGGCTT GTTTACAATG ATGATTTGGC CAAAAATTTT61 GAACTAAAAG CGTGGGTTTG TGTGACTGAT GTGTTTGATG TGGAGAATAT AACAAAAGCA121 ATTCTCAATT CGGTGTTAAA TTCTGATGCA AGTGGCTCTT TGGACTTCCA ACAAATTCAA181 AGGAAATTGA CAGACACGTT AGCAGGGAAA ACTCTTTTTC TCATTCTAGA CGACGTGTGG241 AACGAAAATT ATTGTAATTG GGATCGTTTG CGGGCTCCTT TGAGTGTAGT GGCAAAAGGA301 AGCAAAGTCA TAGTTACAAC ACACAAAAAA AATGTTGCAT TGATGATGGG AGCTGCCAAG361 AATGTTCATG AACTAAACCC TTTATCTGAA GATGATTGTT GGTCTGTGTT TGAGAAGCAT421 GCATTTGAAC ATAGAAATAT CAATGATCAT CCGAATCTGG TGTCCATTGG TAGGAAAATT481 GTTGGCAAAT GTGGTGGATT GCCACTAGCG TTG刺葡萄塘尾(3)抗白粉病候选基因序列：1 GGTGTTGGTA AGACTACCCT TTTGACCCAA ATCAACAATG AGTTCCTCAA AACAACTCAT61 GATTTTGATG TTGTGATCTG GGCTGTGGTG TCACGAGATC CAGACTTTCC CAAGGTTCAA121 GATGAAATTG GGAAAAAGGT TGGGTTTTGT GATGGTATAT GGAGAAATAA AAGCAAGGAT181 GAAAAAGCCA TAGACATCTT TAGAGCCTTG CGCAAAAAGA GGTTTGTGTT GTTAGATGAC241 ATATGGGAGC CGGTAAATCT ATCAGTCTTG GGTGTTCCAG TTCCAAATGA AGAAAATAAG301 TCCAAGCTAG TATTCACAAC CCGATCCGAG GATGTATGCC GCCAAATGGA AGCTCATAAG361 AATATCAAAG TGGAGTGCTT GGCATGGCAG GAATCCTGGG ATTTGTTTCA GAAGAAGGTT421 GGACAAGATA CTCTTGACTC CCATGCAGAA ATCCCCATGC AAGCTGAAAT GGTTGCCAAA481 GAATGTTGCG GATTGCCACT AGCGTTG刺葡萄塘尾(5)抗白粉病候选基因序列：1 GGTGTGGGTA AGACTACGCT CGCACGGCTT GTTTACAATG ATGATTTGGC CAAAAATTTT61 GAACTAAAAG CGTGGGTTTG TGTGACTGAT GTGTTTGATG TGGAGAATAT AACAAAAGCA121 ATTCTCAATT CGGTGTTAAA TTCTGATGCA AGCGGCTCTT TGGACTTCCA ACAAGTTCAA181 CGGAAATTGA CAGTCACATT AGCAGGGAAA ACTCTTTTAC TCATTCTAGA TGACGTGCGG241 AACGAAAATT ATTGTAATTG GGATCGTTTG CGGGCTCCTT TGAGTGTAGT GGCAAAAGGA301 AGCAAAGTCA TAGTTACAAC ACGCAATAAA AATGTTGCAT TGATGATGGG AGCTGCCAAG361 AATGTTCATA AACTAAACCC TTTATCTAAA GATGATTGTT GGTCTGTGTT TGAGAAGCAT421 GCATTTGAAC ATAGGAATAT GGAAGATCAT CCAAACTTGG TGTCCATTGG TAGGAAAATT481 GTTGGCAAGT GTGGGGGATT GCCACTAGCG TTG。塘尾(3)抗白粉病候选基因序列：1 GGTGTTGGTA AGACTACCCT TTTGACCCAA ATCAACAATG AGTTCCTCAA AACAACTCAT61 GATTTTGATG TTGTGATCTG GGCTGTGGTG TCACGAGATC CAGACTTTCC CAAGGTTCAA121 GATGAAATTG GGAAAAAGGT TGGGTTTTGT GATGGTATAT GGAGAAATAA AAGCAAGGAT181 GAAAAAGCCA TAGACATCTT TAGAGCCTTG CGCAAAAAGA GGTTTGTGTT GTTAGATGAC241 ATATGGGAGC CGGTAAATCT ATCAGTCTTG GGTGTTCCAG TTCCAAATGA AGAAAATAAG301 TCCAAGCTAG TATTCACAAC CCGATCCGAG GATGTATGCC GCCAAATGGA AGCTCATAAG361 AATATCAAAG TGGAGTGCTT GGCATGGCAG GAATCCTGGG ATTTGTTTCA GAAGAAGGTT421 GGACAAGATA CTCTTGACTC CCATGCAGAA ATCCCCATGC AAGCTGAAAT GGTTGCCAAA481 GAATGTTGCG GATTGCCACT AGCGTTG塘尾(5)抗白粉病候选基因序列：1 GGTGTGGGTA AGACTACGCT CGCACGGCTT GTTTACAATG ATGATTTGGC CAAAAATTTT61 GAACTAAAAG CGTGGGTTTG TGTGACTGAT GTGTTTGATG TGGAGAATAT AACAAAAGCA121 ATTCTCAATT CGGTGTTAAA TTCTGATGCA AGCGGCTCTT TGGACTTCCA ACAAGTTCAA181 CGGAAATTGA CAGTCACATT AGCAGGGAAA ACTCTTTTAC TCATTCTAGA TGACGTGCGG241 AACGAAAATT ATTGTAATTG GGATCGTTTG CGGGCTCCTT TGAGTGTAGT GGCAAAAGGA301 AGCAAAGTCA TAGTTACAAC ACGCAATAAA AATGTTGCAT TGATGATGGG AGCTGCCAAG361 AATGTTCATA AACTAAACCC TTTATCTAAA GATGATTGTT GGTCTGTGTT TGAGAAGCAT421 GCATTTGAAC ATAGGAATAT GGAAGATCAT CCAAACTTGG TGTCCATTGG TAGGAAAATT481 GTTGGCAAGT GTGGGGGATT GCCACTAGCG TTG。