[发明专利]通过培养Hela细胞制备人乳头瘤病毒的方法无效
| 申请号： | 200510041857.9 | 申请日： | 2005-03-19 |
| 公开（公告）号： | CN1673362A | 公开（公告）日： | 2005-09-28 |
| 发明（设计）人： | 周旭;余黎 | 申请（专利权）人： | 兰州生物制品研究所 |
| 主分类号： | C12N7/02 | 分类号： | C12N7/02;C12N7/04 |
| 代理公司： | 兰州中科华西专利代理有限公司 | 代理人： | 王学定 |
| 地址： | 730046甘肃*** | 国省代码： | 甘肃;62 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种通过培养Hela细胞制备人乳头状瘤病毒的方法。该方法利用Hela细胞在含新生小牛血清的D－MEM培养液，待细胞生长成片以后吸弃培养液，用不含牛血清的D－MEM培养液洗涤细胞后，再在33～35℃静置培养10～14天至Hela细胞出现脱落现象时停止，收集培养液并在4℃10000rpm离心分离，收获上清后经纯化得人乳头状瘤病毒。本发明病毒经形态学鉴定可见典型人乳头瘤病毒，经基因分析确定为人乳头瘤病毒基因。 | ||
| 搜索关键词： | 通过 培养 hela 细胞 制备 乳头 病毒 方法 | ||
【主权项】：
1、一种通过培养Hela细胞制备人乳头状瘤病毒的方法，包括以下步骤：①细胞培养：取液氮冻存的Hela细胞，复苏后加入适宜培养液，在37℃静置培养3～4天，待细胞生长成片以后吸弃培养液，并用适宜的培养液洗涤细胞，再在33～35℃培养至Hela细胞出现脱落现象时停止；②病毒收获：收集培养液并融冻，然后在4℃ 10000rpm离心，收获上清得人乳头状瘤病毒；③病毒纯化：采用蔗糖密度梯度离心或柱层析纯化病毒。
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