[发明专利]一种猪瘟疫苗生产用/牛病毒性腹泻病毒抗体阴性新生牛血清生产工艺

摘要

本发明涉及一种新生牛血清生产工艺，更具体地说，涉及一种猪瘟疫苗生产用/BVDV抗体阴性新生牛血清生产工艺。本发明生产工艺，其工艺流程包括全封闭无菌采血、静置凝固、低温分离、BVDV抗体阴性原料血清筛选、大规模混合、现代膜过滤。本发明的优点是：采用96孔细胞培养板，筛选出BVDV抗体阴性的粗制血清进行加工生产，工作效率高、结果可靠、低成本、适用于工业化生产，提高了猪瘟疫苗的质量、效价和保护率，为养猪业的迅速、健康发展提供了保障。

主权项

1、一种猪瘟疫苗生产用/BVDV抗体阴性新生牛血清生产工艺，其工艺流程包括全封闭无菌采血、静置凝固、低温分离、BVDV抗体阴性原料血清筛选、大规模混合、现代膜过滤，其特征在于：(a)将非疫区出生14h以内未吃初乳，经检疫合格的健康小牛，建立有利于溯源母牛健康档案，根据小牛健康状况、出生时间进行分类编号，实行颈动脉全封闭无菌采血，静置凝固，低温分离收集血清，每1头或2头小牛的血清单独装入专门的血清桶，每桶取样，分别检测BVDV抗体；(b)样品经γ射线或水浴灭活，用病毒中和试验原理，用牛肾或牛睾丸原代细胞在96孔细胞培养板上进行检测；(c)由检测样品、平衡盐、10-6BVDV标准株制成的中和液中和1h，吸附2h后加维持液，在5％CO2 37℃中培养5天，根据细胞病变情况筛选出BVDV抗体阴性的样品，根据其编号挑选出BVDV抗体阴性的血清；(d)将挑选出BVDV抗体阴性的血清，解冻后用现代膜过滤，加入细胞加强剂，然后用大规模混合罐混合、再进行分装。