[发明专利]昆虫病原线虫共生菌的分段供氧发酵工艺及其发酵物用途

摘要

本发明涉及一种昆虫病原线虫共生菌抗菌活性的分段供氧发酵工艺及其发酵液的应用。该工艺以嗜线虫致病杆菌Xenorhabdus nematophilusYL001为材料，在发酵过程中，采用通过调节通气量和搅拌转速分段供氧。用本发明所建立的发酵工艺进行昆虫病原线虫共生菌的发酵，细胞生长量和抗菌活性明显高于单一供氧的发酵方式。其发酵工艺得到发酵液可用于制备防治植物病害杀菌剂。

主权项

1、一种昆虫病原线虫共生菌的分段供氧发酵工艺，其特征在于，发酵菌株为嗜线虫致病杆菌Xenorhabdus nematophilus YL001；并按下列步骤进行：(1)将种管保存的上述嗜线虫致病杆菌，划线于NA培养基平板上，28℃培养24～48h，挑取单菌落，再划线于NBTA培养基平板上，28℃培养24～48h；(2)用接种环挑取NBTA培养基平板上的蓝色菌落，接种于装有50ml NB培养基的250ml三角瓶中，28℃、180r/min振荡培养16-24h，成为一级种子液；(3)将一级种子液按9.0％的接种量接入装有种子培养基的250ml三角瓶中，装液量为25ml，在26℃、220rpm振荡培养16-24h，成为二级种子液；(4)在7L搅拌式发酵罐内加入4.5L发酵培养基，0.01％消泡剂，pH7.2，离位0.1-0.15MPa蒸汽灭菌30min冷却至26℃，按9.0％接入二级种子液，26℃培养72h，发酵过程调节通气量和搅拌转速，分段供氧，即可获得发酵物，将发酵物过滤，去除细胞得到发酵液。