[发明专利]一种分离纯化红毛新碱B化合物的方法

摘要

本发明公开了一种分离红毛新碱B化合物的方法，原料选用红毛七总生物碱浸膏，将红毛七总生物碱浸膏用适量甲醇或乙醇溶解后，与柱层析硅胶拌样。取柱层析用硅胶，氯仿－甲醇－氨水湿法装柱，平衡柱子。将所拌好的样品上柱层析硅胶柱，氯仿－甲醇－氨水为洗脱剂进行洗脱。按照色带收集样品。然后改用甲醇为洗脱剂进行洗脱，按照色带收集样品。最后用甲醇－盐酸为洗脱剂进行洗脱，按照色带收集样品，即可得到红毛七总生物碱中的HMQ1～HMQ9九个部位，然后对HMQ6和HMQ8两个部位进行进一步分离。分别采用氯仿－甲醇－氨水为洗脱剂或甲醇为洗脱剂进行洗脱，按照色带收集样品。即可得到化合物红毛新碱B，其方法快速、简便、有效。

主权项

1.一种分离纯化红毛新碱B化合物的方法，原料选用红毛七总生物碱浸膏，其特征在于，包括以下步骤：1)将红毛七总生物碱浸膏用甲醇或乙醇充分溶解以后，过滤，得到红毛七总生物碱的甲醇溶液或乙醇溶液；将此溶液用柱层析用硅胶吸附、分散，进行柱色谱层析分离；2)将样品上柱层析硅胶柱，以氯仿∶甲醇∶氨水＝3∶1∶0.1为洗脱剂进行第一次洗脱，得到HMQ1～HMQ6六个部位，然后按照色带收集样品，得到红色色带的HMQ6浸膏；3)然后再对上述第一次洗脱后的甲醇溶液或乙醇溶液改用甲醇为洗脱剂进行第二次洗脱，得到HMQ7～HMQ9三个部位，按照色带收集样品，得到红色色带的HMQ8浸膏；4)红毛新碱B的分离(1)样品的制备：将HMQ6和HMQ8的浸膏用甲醇充分溶解以后，过滤，得到红毛七总生物碱中有效部位HMQ6和HMQ8的甲醇溶液，将此溶液与柱层析用硅胶拌样，挥干甲醇后，用于柱层析分离；(2)色谱柱的准备：取柱层析硅胶，氯仿-甲醇-氨水＝6∶1∶0.05为流动相湿法装柱，平衡柱子放置过夜，对红毛七总生物碱中HMQ6和HMQ8的分离；(3)HMQ6和HMQ8的分离：将HMQ6和HMQ8上柱样品用准备好的分离柱进行分离，上柱样品与装柱所用的硅胶重量比为1∶50，上好样品后，采用氯仿-甲醇-氨水＝6∶1∶0.05为洗脱剂进行洗脱，按照色带收集样品，分别记为HMQ6-1、HMQ6-2、HMQ6-3、HMQ6-4、HMQ6-5、HMQ8-1、HMQ8-2、HMQ8-3；对得到的上述样品按照心血管细胞膜色谱模型和初步药理学实验进行筛选，HMQ6-4样品即为红毛七总生物碱HMQ6中作用于心血管的化合物红毛新碱B；5)红毛新碱B的纯化：采用重结晶的方法对红毛新碱B进行纯化，重结晶所用的溶剂为水和氨水的混合物，其比例为10∶1，于4℃保存，即可得到橘黄色絮状沉淀的红毛新碱B纯品。