[发明专利]一种脱细胞基质异种骨的制作方法

摘要

本发明公开了一种脱细胞基质异种骨的制作方法，它包括普通洗涤剂去污蒸馏水冲洗、双氧水H₂O₂去蛋白双蒸水冲洗、氯仿、甲醇混合液去酯双蒸水循环冲洗、十二烷基硫酸钠SDS、蛋白酶抑制剂PMSF及胰蛋白酶脱细胞双蒸水循环冲洗、环氧乙烷或Co⁶⁰杀菌消毒等工艺步骤，使通过该方法处理的异种骨在完全保留骨的有机成分和无机成分情况下，细胞完全脱出，从而获得了脱细胞基质异种骨。该脱细胞基质异种骨排斥性几率非常小，植入后对受体的全身及局部免疫无明显影响，具有较好的相容性及骨传导性。该方法具有原料来源丰富、制作成本低，效益明显的优点，与市场同类产品相比更具有竞争力。

主权项

1.一种脱细胞基质异种骨的制作方法，其特征在于：它包括如下步骤；a.去污：采用普通洗涤剂将异种骨的骨头表面的油污等杂质洗净，然后再用蒸馏水冲洗干净，凉干后获得完全的骨头基质；b.去蛋白：在室温或37℃烤箱的条件下，将上述去污步骤后获得的骨头基质放入浓度为15～20％的双氧水H2O2中浸泡24～48小时，然后再用双蒸水冲洗至干净无泡沫为止；c.去酯：在室温条件下，将上述去蛋白步骤后获得的骨头基质放入1∶1～3∶1的氯仿∶甲醇的混合液中采用持续震荡的方式浸泡24～48小时，然后再用双蒸水循环冲洗至无氯仿和甲醇的味道为止；d.脱细胞：在2～5℃条件下，将上述去酯步骤后获得的骨头基质放入浓度为0.5～1.0％的十二烷基硫酸钠SDS和浓度为0.8～1.2％的蛋白酶抑制剂PMSF的混合液中采用搅拌震荡的方式浸泡24～48小时，然后再用双蒸水循环冲洗24～48小时；在2～5℃条件下，再将骨头基质放入浓度为0.1～0.4％的胰蛋白酶中浸泡12～24小时，然后再用双蒸水循环冲洗20～28小时，获得脱细胞基质异种骨；e.杀菌消毒、包装：采用冻干机冻干的方式将脱细胞基质异种骨冻干，然后进行封装，采用环氧乙烷或Co60进行杀菌消毒。