[发明专利]一种高效转糖基β-半乳糖苷酶基因无效
申请号: | 200510044897.9 | 申请日: | 2005-10-11 |
公开(公告)号: | CN1786170A | 公开(公告)日: | 2006-06-14 |
发明(设计)人: | 肖敏;卢丽丽 | 申请(专利权)人: | 山东大学 |
主分类号: | C12N15/56 | 分类号: | C12N15/56;C12N9/38;C12N15/70;C12P19/14 |
代理公司: | 济南圣达专利商标事务所 | 代理人: | 郑华清 |
地址: | 250100*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | 本发明公开了一种高效转糖基β-半乳糖苷酶基因,所述基因由阴沟肠杆菌(Enterobacter cloacae)B5 CGMCC No.1401基因组DNA借助PCR扩增获得。该基因核苷酸序列全长3090碱基,编码1029个氨基酸。由该基因表达的重组酶特征为:酶为四亚基蛋白,聚合体分子量为391kD,单亚基分子量为97.8kD;酶对乳糖的Km值为0.32mmol/L,Vmax为210.70μmol/(L·min);酶对邻硝基苯酚-β-D-半乳糖苷的Km值接近于0;酶最适反应温度为35℃,最适反应pH为6.5~9.5;酶在室温能稳定保存至少2个月;酶以乳糖为底物转糖基生成的低聚半乳糖产率为55%;酶转糖基的受体底物特异性很广,可用以合成多种半乳糖苷化合物。酶基因的获得,可用于基因改造获得新的β-半乳糖苷合成酶,从根本上提高半乳糖苷化合物的合成效率。 | ||
搜索关键词: | 一种 高效 转糖基 半乳糖 基因 | ||
【主权项】:
1.一种高效转糖基β-半乳糖苷酶基因,具有如下特征:(1)具有如SEQ ID No.1所示核苷酸序列,全长3090碱基;(2)由于遗传密码的简并性,具有不同于SEQ ID No.1所示核苷酸序列但与SEQID No.1所编码的氨基酸序列相同的核苷酸序列;(3)该基因编码1029个氨基酸,序列如SEQ ID No.1所示。
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