[发明专利]动物用重组干扰素的生产方法

摘要

本发明公开一种动物用重组干扰素的生产方法，是在现有技术的基础上，对粗制重组干扰素浓缩、分离、提纯、配制及滤膜除菌。所生产的重组干扰素除具有生产成本低、避免潜在携带外源病毒及其他病原微生物的优点之外，同时全过程蛋白质回收率为25％，产品中不含杂蛋白，提高了产品的纯度且DNA及热源质含量合格；改变了活性成分的存在方式，增强了产品的活性，使产品的活性成分真正发挥了活性作用。

主权项

1.一种动物用重组干扰素的生产方法，将动物干扰素的基因克隆到表达载体pBV220中，并转化到大肠杆菌DH5α中，将筛选的阳性克隆用温度诱导表达生产菌种并制成粗制干扰素，其特征在于还包括如下步骤：a.将粗制干扰素经截流量为10000相对分子量的中空纤维素超滤器浓缩；b.将浓缩的干扰素溶液经Sephadex G50分离，层系2cm*100cm，先用20mmol/l、pH7.0磷酸盐缓冲液平衡，上柱后用同一缓冲液洗脱分离，经SDS-PAGE检查，收集干扰素部分；c.将收集的干扰素再经DE-52柱纯化，上柱后用含0.05、0.1、0.15mol/LNaCl的20mM/L、pH7.0磷酸盐缓冲溶液分别洗涤，收集含干扰素的洗脱液，得半成品；d.将半成品用无热原生理盐水稀释，使最终干扰素含量为1％～2％，然后用0.22μm孔径滤膜除菌，分装。