[发明专利]一种蒲葵种子的保藏育苗方法

摘要

本发明公开了一种蒲葵种子的保藏育苗方法，先对种子进行灭菌、胚分离和脱水，然后将胚装入无菌的低温冻存管并置于液氮生物容器中，使低温冻存管快速降温。当需要幼苗时，将低温冻存管从液氮中取出，投入30～35℃的温水中，将温度恢复到室温。最后在培养皿内对胚进行培养，2～3个月即可成苗。本发明使蒲葵种子得以长期保存，其操作简便，成本低廉，种子存活率接近100％，成苗率在95％以上，具有良好的应用前景。同时，本发明的方法对其他顽拗性种子保藏技术的完善也具有积极的促进作用。

主权项

1、一种蒲葵种子的保藏育苗方法，该方法由以下步骤组成：①保藏种子的采收：选择花后120～180天的果序，除去外果皮，收集种子并装入聚乙烯袋，在10℃～20℃条件下贮存备用；②种子的灭菌：取备用的种子，先用70％～80％酒精浸泡1～3分钟，然后在0.05％～0.15％的升汞溶液中浸泡10～30分钟，再用无菌水漂洗4～6次，每次5～8分钟；③胚的剥取：用枝剪从胚的两侧各剪一刀，再用解剖刀分离胚；④脱水处理：按每15～25个胚90g～110g活化硅胶的比例，把蒲葵胚放入有盖的小盒内用硅胶脱水5～9小时，将胚的含水量降至10～15％，然后立即把胚装入无菌的低温冻存管，每管装15～20个胚；⑤保藏：将装有胚的低温冻存管置于液氮生物容器中，使低温冻存管完全浸泡在液氮中快速降温，经常检查液氮生物容器中的液氮存量，及时补充丧失的液氮；⑥当需要蒲葵幼苗时，将装有胚的低温冻存管从液氮容器中取出，投入30～35℃的温水中1～2分钟，将温度恢复到室温；⑦育苗：以MS培养基为基盐，每升添加160～180mg磷酸二氢钠，25～35g蔗糖，0.1～0.2mg萘乙酸和0.1～0.3mg 6-苄基腺嘌呤和8～12g琼脂固定，在培养皿内装10～15ml培养基，对胚进行培养；设定温度30～35℃，保证每天16小时光照、8小时黑暗条件下进行培养，2～3个月可以成苗。