[发明专利]偶联酶促反应测定腺苷脱氨酶的方法和试剂盒无效

专利信息
申请号: 200510053206.1 申请日: 2005-02-06
公开(公告)号: CN1693881A 公开(公告)日: 2005-11-09
发明(设计)人: 蔡枫 申请(专利权)人: 浙江亚克药业有限公司;蔡枫
主分类号: G01N21/78 分类号: G01N21/78;G01N33/50;C12Q1/26;C12Q1/68;C12Q1/00
代理公司: 暂无信息 代理人: 暂无信息
地址: 310053浙江*** 国省代码: 浙江;33
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摘要: Heinz(1980)借助腺苷脱氨酶将腺苷脱氨产生次黄苷,通过次黄苷偶联嘌呤核苷磷酸化酶和黄嘌呤氧化酶酶促反应生成过氧化氢,在过氧化氢酶和醛脱氢酶的作用下,测量334nm处NADPH吸光度上升的速率来测算腺苷脱氨酶活性。该法缺点是试剂成本过高。本发明引入Trinder氏反应,将次黄苷偶联酶促反应生成的过氧化氢在过氧化物酶的作用下使苯胺类供氢体和4-氨基安替比林偶联物凝聚成有色产物。通过连续反应和动态观察有色产物的产量,从而测定腺苷脱氨酶的活性。本发明简化了Heinz氏测定腺苷脱氨酶的次黄苷偶联酶促反应体系,降低了试剂成本。本发明将苯胺类化合物ADOS、ADPS、ALPS、TODB、TOOS和TOPS用作Trinder氏反应的供氢体,增加了反应的灵活性。本发明还涉及用于进行上述方法的试剂盒。
搜索关键词: 偶联酶促 反应 测定 腺苷 脱氨酶 方法 试剂盒
【主权项】:
1.一种测定生物样本中腺苷脱氨酶活性的方法,其特征是借助腺苷脱氨酶将腺苷脱氨产生次黄苷,通过次黄苷偶联嘌呤核苷磷酸化酶和黄嘌呤氧化酶酶促反应生成过氧化氢,过氧化氢在过氧化物酶的作用下使苯胺类供氢体和4-氨基安替比林偶联物凝聚成有色产物,通过连续反应和动态观察有色产物的产量,从而测定腺苷脱氨酶的活性。
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