[发明专利]用发根农杆菌遗传转化获得产鬼臼毒素的西藏桃儿七毛状根的方法及产物无效
| 申请号： | 200510057282.X | 申请日： | 2005-09-21 |
| 公开（公告）号： | CN1769444A | 公开（公告）日： | 2006-05-10 |
| 发明（设计）人： | 兰小中;鲍隆友;廖志华;李春燕 | 申请（专利权）人： | 兰小中;鲍隆友;廖志华;李春燕 |
| 主分类号： | C12N15/09 | 分类号： | C12N15/09;C12N15/82;C12N5/04;C12Q1/68;A01H5/00 |
| 代理公司： | 重庆华科专利事务所 | 代理人： | 康海燕 |
| 地址： | 860000西藏自治区林芝*** | 国省代码： | 西藏;54 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种利用基因工程技术遗传转化西藏桃儿七，获得生产鬼臼毒素的西藏桃儿七的毛状根的方法。涉及包含发根农杆菌遗传转化西藏桃儿七的方法，遗传转化获得可生产鬼臼毒素的西藏桃儿七毛状根。其过程是用发根农杆菌遗传转化西藏桃儿七，获得了西藏桃儿七毛状根，经分子检测确为遗传转化的毛状根，HPLC检测表明遗传转化获得的西藏桃儿七毛状根能够生产鬼臼毒素。本方法可以为鬼臼毒素的生产提供一种新型可持续的新型药源。 | ||
| 搜索关键词： | 发根 杆菌 遗传 转化 获得 产鬼臼 毒素 西藏 桃儿七毛状根 方法 产物 | ||
【主权项】：
1.一种获得产鬼臼毒素西藏桃儿七毛状根的方法，特征在于采用转基因技术，用发根农杆菌遗传转化西藏桃儿七的细胞、组织、器官、植株；其步骤如下：(1)西藏桃儿七无菌外植体的获得；(2)采用转基因方法转移发根农杆菌的Ri质粒的T-DNA到西藏桃儿七细胞、组织、器官、植株中，转基因方法选择发根农杆菌Ri质粒介导遗传转化、基因枪法介导的遗传转化、花粉管通道介导基因转化或生殖细胞浸泡法介导基因转化，步骤如下：A、活化发根农杆菌；B、发根农杆菌浸染西藏桃儿七无菌外植体；C、发根农杆菌与西藏桃儿七无菌外植体的共培养；D、西藏桃儿七的除菌培养；(3)西藏桃儿七毛状根的获得与继代培养；(4)西藏桃儿七毛状根的分子检测；(5)西藏桃儿七毛状根中鬼臼毒素的检测。
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