[发明专利]一种快速微量检测组织活性氧的方法无效
| 申请号： | 200510060280.6 | 申请日： | 2005-08-04 |
| 公开（公告）号： | CN1737539A | 公开（公告）日： | 2006-02-22 |
| 发明（设计）人： | 王晓峰;刘慧刚;连灵君;徐立红 | 申请（专利权）人： | 浙江大学 |
| 主分类号： | G01N21/64 | 分类号： | G01N21/64;G01N1/28;G01N33/48 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 310031浙江省杭*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 一种快速微量检测组织活性氧的方法，在96孔板中加入190微升匀浆上清液、10微升1毫摩尔/升的DCFH－DA溶液，置于酶标仪中，37℃保温，30分钟后于激发波长为485纳米、发射波长538纳米检测荧光强度。该方法反应直接在96孔板中进行，可同时测定多个样品，提高了检测效率，缩短了检测周期。并采用微量加样法，所需样品及试剂消耗减少。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 快速 微量 检测 组织 活性氧 方法 | ||
【主权项】：
1、一种快速微量检测组织活性氧的方法，其特征在于，该方法按下列步骤顺序进行(以小鼠肝脏活性氧测定为例)：A、称取约0.05克组织，按1∶20(质量/体积)比例加入冰冷的100毫摩尔/升磷酸缓冲液，用玻璃匀浆器匀浆。B、1000g，4℃离心10分钟取上清。C、在96孔板中加入190微升匀浆上清液、10微升1毫摩尔/升的DCFH-DA溶液(DCFH-DA终浓度为50微摩尔/升)，用移液器吹打，使之充分混匀。D、置于酶标仪中，37℃保温，30分钟后于激发波长为485纳米、发射波长538纳米检测荧光强度。E、另取50微升上清匀浆液，稀释30倍，取100微升进行蛋白定量。F、结果以荧光强度/毫克蛋白表示。
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