[发明专利]重组金黄色葡萄球菌肠毒素C2的制备方法

摘要

本发明提供重组金黄色葡萄球菌肠毒素C2(SEC2)的制备方法，通过以下步骤实现：SEC2基因的扩增制备；SEC2基因与原核表达质粒的连接；重组质粒转化至表达宿主进行高效表达；重组SEC2的纯化。本发明方法对重组SEC2进行了高效表达，表达强度占全菌蛋白的20％左右，且为可溶性表达，不产生包涵体，便于后续分离纯化。本发明方法具有步骤简单，纯化速度快的特点；纯化产物的纯度比离子交换层析或分子筛层析等方法所得到的产物都要高。融合蛋白经肠激酶高效切割后，所得到的重组蛋白与相应的天然蛋白相比，具有相似的超抗原活性和免疫学活性。

主权项

1.重组金黄色葡萄球菌肠毒素C2的制备方法，其特征在于：从金黄色葡萄球菌FRI 1230菌株中PCR扩增得到表达SEC2的基因片断，将该基因片断通过PCR添加酶切位点后克隆至pGEX-4T-1质粒，再将该重组质粒转化至合适的大肠杆菌表达宿主，使重组SEC2在分泌之初带有谷胱甘肽转移酶标签，并使用亲和填料纯化该目标重组蛋白，具有SEQ NO 6的蛋白质氨基酸序列及相应的核苷酸序列。