[发明专利]鸡传染性支气管炎病毒S1重组蛋白抗原、制备方法及用途无效
申请号: | 200510061375.X | 申请日: | 2005-11-02 |
公开(公告)号: | CN1763085A | 公开(公告)日: | 2006-04-26 |
发明(设计)人: | 周继勇;吴建祥;胡金强;张德勇 | 申请(专利权)人: | 浙江大学 |
主分类号: | C07K14/165 | 分类号: | C07K14/165;C12N15/09;G01N33/535 |
代理公司: | 杭州求是专利事务所有限公司 | 代理人: | 张法高 |
地址: | 310027浙*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | 本发明公开了一种鸡传染性支气管炎病毒S1重组蛋白抗原、制备方法及其用途。这些核苷酸序列分别由SEQID NO.1~3所示。本发明提供了含有编码3种截短S1蛋白的原核表达方法,分别能够表达三株IBV(ZJ971株,M41株,J株)S1蛋白氨基端288bp或309bp部分片段,提供了三株IBV S1蛋白表达产物的纯化方法。用IBV阳性血清检测,表达的部分S1蛋白具有很好的抗原反应性,可作为诊断抗原应用于琼脂扩散诊断技术,酶联免疫吸附试验,免疫荧光检测,免疫组织化学检测等检测IBV感染或免疫产生的抗体。此外,表达的部分S1蛋白还可进一步制备单克隆抗体、多克隆抗体利用ELISA等实验方法来检测IBV抗原的存在或配以适当疫苗佐剂制备亚单位疫苗。 | ||
搜索关键词: | 传染性 支气管炎 病毒 s1 重组 蛋白 抗原 制备 方法 用途 | ||
【主权项】:
1.一种鸡传染性支气管炎病毒S1重组蛋白抗原、其特征在于:IBV核糖核酸为模板,通过反转录聚合酶链式反应扩增获得截短IBV S1核苷酸序列,并克隆于大肠杆菌原核表达载体pET-28a,转化入大肠杆菌BL21宿主细胞后用IPTG诱导表达,经Ni-NTA Argarose纯化,获得截短表达的IBV S1蛋白抗原。
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