[发明专利]一种土壤微生物DNA的提取方法无效
| 申请号： | 200510061875.3 | 申请日： | 2005-12-07 |
| 公开（公告）号： | CN1978453A | 公开（公告）日： | 2007-06-13 |
| 发明（设计）人： | 钱海丰;程秋霞;王智烨;徐茜;许皓 | 申请（专利权）人： | 浙江工业大学 |
| 主分类号： | C07H21/00 | 分类号： | C07H21/00;C07H1/08 |
| 代理公司： | 杭州天正专利事务所有限公司 | 代理人： | 黄美娟;袁木棋 |
| 地址： | 310014*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种土壤微生物DNA的提取方法，所述的方法包括土壤微生物细胞裂解、粗DNA溶液的获得、土壤微生物DNA的获得等步骤；本发明所述的方法是利用PVPP、蛋白酶K等化学物质的有效组合，通过PEG20000、异丙醇等有机溶剂的沉淀后，用分光光度计测定OD260/OD230、OD260/OD280值接近于标准值，可直接应用于分子操作，具有重大应用前景。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 土壤 微生物 dna 提取 方法 | ||
【主权项】：
1.一种土壤微生物DNA的提取方法，其特征在于所述的方法步骤如下：(1)土壤微生物细胞裂解：土壤置于含蛋白酶K0.1～0.4g/L、交联聚乙烯吡咯烷酮0.01～0.02g/L的细胞裂解缓冲液中，50～60℃振荡30～60min后，每100mL裂解缓冲液加入1g表面活性剂，60～70℃温浴，离心，取上清液得细胞裂解液；(2)粗DNA溶液的获得：将步骤(1)所得细胞裂解液加入0.5～1倍体积的聚乙二醇溶液，室温沉淀1～3h后，离心，取沉淀，用TE溶液溶解，即得粗DNA溶液，所述TE溶液为10mMTris，1mM EDTA，pH8.0；(3)土壤微生物DNA的获得：将粗DNA溶液去蛋白，经分离纯化即得所述的土壤微生物DNA。
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