[发明专利]用于检测梨火疫病菌的一步双重PCR方法

摘要

本发明用于检测梨火疫病菌的一步双重PCR方法，适用于检测梨火疫病菌。属于农作物病害防治和植物检疫技术领域。该方法根据梨火疫病菌的pEA29质粒和基因组ams基因序列，设计二对特异性引物，在同一反应体系中同时检测梨火疫病菌，扩增产物大小分别为1.0kb和1.5kb，这两对引物的检测灵敏度达到了3个细菌细胞。是对梨火疫病菌pEA29质粒特异性引物检测方法的补充和改进。对于不含有pEA29质粒的梨火疫病菌菌株也可以进行检测。同时，本方法采用双重PCR技术，二对引物在同一反应体系中同时扩增，提高了检测的准确性，节约了检测时间，可以试剂盒的形式在我国口岸大规模推广。

主权项

1.包括梨火疫病菌特异性检测引物两对，primerA/B和primier E/F，其引物序列为：Primer A：5’-CGGTTTTTAACGCTGGG-3’Primer B：5’-GGGCAAATACTCGGATT-3’Primer E：5’-AATAAGGTGCCTGGTAATG-3’Primer F：5’-GGTGGAATGAGACTGGGTA-3’其中primer A/B引物对在梨火疫病菌中特异性扩增出1.0kb的产物，primer E/F引物对在梨火疫病菌中特异性扩增出1.5kb的产物。